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上海抚生实业有限公司>技术文章>ELISA试剂盒液体类标本使用注意事项

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ELISA试剂盒液体类标本使用注意事项

阅读:234          发布时间:2021-12-27

在收集标本前必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成分是否足够稳定,我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,请及时储存在4℃的条件下备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请在造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保持。因冰室与室温存在一定的温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以请避免反复冻融。

液体类标本:

包括血清,血浆,尿液,胸腹水,脑脊液,细胞培养上清液等。

1、血清:

室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,如保存过程中如有沉淀,请再次离心。

2、血浆:

应根据标本的要求选择EDTA,柠檬酸钠或者肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,在离心20分钟(2000-3000转/分),仔细收集上清,如保存过程中有沉淀,请再次离心。

3、尿液:

用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,如保存过程中有沉淀,请再次离心。

4、细胞培养上清:

检测分泌性的成份时,用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,当细胞浓度达到100万/ml左右,通过反复冻融,使细胞破坏并释放细胞内的成份,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,如保存过程中有沉淀,请再次离心。

5、组织标本:

切割标本后,称取重量,加入一定量的PBS(PH7.4),用液氮迅速冷冻保存备用,标本融化后仍保持2-8℃的温度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,分装后留一份待检测,其余冷冻备用。


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