详细介绍
细胞名称 猕猴肌肉细胞;MMm7培养
形态特性 成纤维细胞样
品牌 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雄性猕猴的肌肉组织。2006年由中科院昆明细胞库建立。
培养条件 M-199:
with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%FBS
传代方法 1:
2传代;3-4天一次
传代情况 P3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 B类
猕猴肌肉细胞;MMm7培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
猕猴肌肉细胞;MMm7培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-GAD-67 /FITC 荧光素标记谷氨酸脱羧酶-67抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Nox-4/NADH /FITC 荧光素标记NADPH氧化酶4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh BRCC4/BRCC45 癌易感基因复合蛋白4抗体 规格 0.2ml
Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰岛素受体-α(抗原) 0.5mg
HEATR2 英文名称: HEATR2蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh RGAG4 RGAG4蛋白抗体 规格 0.2ml
Anti-Nox-4/NADH /FITC 荧光素标记NADPH氧化酶4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
ING1/p33(inhibitor of growth gene 1) 生长抑制因子基因1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-ADFP 脂肪组织分化相关蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Cdc25B (Ser186) 磷酸化细胞分裂周期蛋白25B抗体 规格 0.1ml
品名 规格 备注
Wnt3a 英文名称: 信号通路Wnt3a抗体 0.1ml
DMWD 英文名称: 强直性肌营养不良相关蛋白9抗体 0.2ml
Anti-ADFP 脂肪组织分化相关蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rabbit Anti-human IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗人IgM 0.1ml
FGFR3 英文名称: 成纤维细胞生长因子受体3抗体 0.1ml
胶质细胞谷氨酸运载蛋白1 抗体 Anti-EAAT1/Glast 0.1ml
Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009) /FITC 荧光素标记磷酸化血小板源性生长因子受体-B抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-TIF1 beta(Ser824) 磷酸化转录中介因子Tif1β抗体 规格 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG/FITC 荧光素标记兔抗小鼠IgGMulti-class antibodies规格: 0.3ml
猕猴肌肉细胞;MMm7培养Human tumour necrosis factor related weak inducer of apoptosis,TWEAK ELISA Kit 人坏死因子相关弱凋亡诱导因子Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020) 磷酸化SH2结构含磷酸肌醇SHIP1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GP1B/CD42b 血小板糖蛋白GPIb抗体 规格 0.2ml
EL(Mouse Endothelial lipase) ELISA Kit 小鼠内皮脂肪酶 96T
Phospho-eNOS (Ser116) 英文名称: 磷酸化一氧化氮合成酶3(内皮型)抗体 0.1ml
BBS2 英文名称: 巴尔得-别德尔综合征相关蛋白2抗体 0.2ml
Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020) 磷酸化SH2结构含磷酸肌醇SHIP1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
猕猴肌肉细胞;MMm7培养悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。