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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
实验室分离的小鼠阴茎白膜成纤维采用胶原酶-联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
实验室分离的小鼠阴茎白膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 小鼠阴茎白膜成纤维原代细胞 | 组织来源 | 阴茎 |
英文名称 | Mouse Penile Tunica Albuginea Fibroblast Cells | 货号 | YS-01X8545 |
产品规格 | 5×10?Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
小鼠阴茎白膜成纤维细胞分离自阴茎白膜组织；海绵体，又称海绵体肌，是硬的平滑肌和结缔组织。海绵体是一种勃起组织，外面包有坚厚的白膜，内部由结缔组织和平滑肌组成海绵状支架，其腔隙与血管相通。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的阴茎白膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。阴茎白膜成纤维细胞（PLFs）作为牙周膜的主体细胞，是牙周膜主要的间质细胞，它不仅具有合成胶原、基质、弹力纤维和糖蛋白的功能，还有吸收胶原吞噬异物的能力，还参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在，利用牙周膜细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3代左右
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
小鼠阴茎白膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
VERO E6细胞，猴肾细胞系 Lec1(卵巢细胞) 小鼠结缔组织L细胞株929克隆;L-929 [L929] | 核糖核苷酸还原酶亚基R2抗体 |
T细胞急性淋巴母细胞白血病相关抗原1抗体 | 细胞外基质蛋白1抗体 |
锚蛋白重复域28抗体 | 电压门控性钾通道蛋白亚基KV6.3抗体 |
元引导蛋白3抗体 | 亲联蛋白2抗体 |
血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗体 | 甲状腺激素转运蛋白/单羧酸转运蛋白7/8抗体 |
EFNA5 Protein Canine 重组狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签) | 小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素);AtT-20 |
293T/17[HEK 293T/17]细胞，人胚肾细胞 人胆管细胞型肝癌细胞,HCCC-9810细胞 CL-0160Molt-4(人急性淋巴母细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2 | 仓鼠卵巢细胞;Lec1 |
大鼠晶状体上皮细胞培养基 100mL | IL36G Protein Mouse 重组小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白 (His 标签) |
人真皮微血管内皮细胞培养基 100mL | SF-295(人XG恶性胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 |
EB (NBL-4)牛胚气管细胞 EB (NBL-4) of bovine embryo acheal cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS | 小鼠阴茎白膜成纤维原代细胞电压门控性钾通道蛋白亚基KV6.3抗体 |
VEGFC Protein Rat 重组大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 标签) | HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) |
SK-MES-1人肺鳞癌细胞 SK-MES-1 human lung squamous carcinoma cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS | 人脐带间充质干细胞HUMSC |
表达小鼠MHCⅠ类分子Kb的人胚肾细胞;293KB | 天冬-特异家族抗体 |
钙调蛋白激酶激酶β抗体 | CXCL12 Protein Human 重组人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a, His 标签) |
原钙粘附蛋白1抗体 | 酸羧化酶抗体 |
类固醇受体激活蛋白2抗体 | EFNA5 Protein Canine 重组狗 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签) |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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