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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
公司实验室分离的小鼠牙周膜成纤维采用胶原酶-联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的小鼠牙周膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 小鼠牙周膜成纤维原代细胞 | 组织来源 | 牙周膜组织 |
英文名称 | Mouse Periodontal Ligament Fibroblast Cells | 货号 | YS-01X7594 |
产品规格 | 5×10?Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
小鼠牙周膜成纤维细胞分离自牙周膜组织；牙周膜（牙周韧带、牙周间隙）是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束，纤维的一端埋于牙骨质内，另一端则埋于牙槽窝骨壁里，使牙齿固位于牙槽窝内；牙周膜内有、血管、淋巴和上皮细胞等。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的牙周膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。牙周膜成纤维细胞（PLFs）作为牙周膜的主体细胞，是牙周膜主要的间质细胞，它不仅具有合成胶原、基质、弹力纤维和糖蛋白的功能，还有吸收胶原吞噬异物的能力，还参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在，利用牙周膜细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
95-D细胞，人高转移肺癌细胞 转血小板基因仓鼠卵巢细胞,CHO-pt细胞 CM-M018小鼠颌下腺上皮细胞培养基100mL | 核受体辅助抑制因子1抗体 |
T淋巴细胞负调节蛋白抗体 | 细胞衰老相关蛋白ASF1A抗体 |
锚蛋白重复结构域蛋白32抗体 | 电压门控通道5α抗体 |
元特异性烯醇化酶/γ 烯醇化酶抗体 | 亲核素β1抗体 |
溴脱氧尿苷单克隆抗体（增殖标志物） | 甲状腺过氧化物酶抗体 |
SCaBER(人膀胱鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | 小鼠癌细胞;CCC-Ca761-03 |
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA 淋巴瘤细胞，P388D1细胞 IF细胞，兔成骨C细胞 | 人胚肾细胞;293 [HEK-293] |
原代胶质细胞特制基础培养基Many types of cells包装：500/250/100ml | NCI-H1703(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
犬肾细胞系/IgR;MDCK/IgR | 人间充质干细胞(肝脏)cDNAHMSC-hp cDNA |
6T-CEM细胞，人T细胞白血病细胞 绿色荧光蛋白标记小鼠子细胞,U14-GFP细胞 前脂肪细胞分化培养基PADM-prf | 小鼠牙周膜成纤维原代细胞电压门控通道5α抗体 |
HBMEC 人脑微血管内皮细胞 | SW480(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照) |
CD84 Others Mouse 小鼠 CD84 人细胞裂解液 (阳性对照) | CM-R033大鼠肝实质细胞培养基100mL |
TGFA Protein Human 重组人 TGFA / TGF-alpha 蛋白 | 糖原合酶激酶-3β抗体 |
钙连蛋白抗体 | CRT 胶质瘤细胞 |
原钙粘蛋白γC4抗体 | 表皮细胞表面抗原1抗体 |
类白细胞抗原G抗体（C端） | SCaBER(人膀胱鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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