化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠外周血白采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠外周血白經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠外周血白原代細胞 | 組織來源 | 外周血 |
英文名稱 | Mouse Peripheral Blood Leukocyte Cells | 貨號 | YS-01X7104 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠外周血白細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞（Leukocyte），舊稱白血球，血液中的一類細胞。根據(jù)白細胞的細胞質內(nèi)有無特殊顆粒，可將其分為有粒白細胞和無粒白細胞。前者常簡稱為粒細胞，根據(jù)其特殊顆粒的染色特性，又分為粒細胞、嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞，白細胞也通常被稱為免疫細胞。在顯微鏡下可以看到，血細胞中體積比較大、數(shù)量比較少，具有細胞核；其主要作用是吞噬細菌、防御疾病。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
人脂肪微血管內(nèi)皮細胞HAMEC | 干擾素alpha 14蛋白抗體 |
孤兒核受體PAR1抗體 | CHX10蛋白抗體 |
紅細胞生成素受體抗體 | 生長激素誘導跨膜蛋白抗體（真皮源性蛋白2） |
環(huán)化酶相關蛋白CAP-2抗體 | 軸絲中鏈動力蛋白抗體 |
Ⅰ型補體受體抗體（C3b/C4b受體抗體） | 二甲基化組蛋白H3K9抗體 |
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL13RA2 Others Human 人 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照) |
牛腎細胞;MDBK(NBL-1) | VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
ACP5 Others Mouse 小鼠 ACP5 / AP 人細胞裂解液 (陽性對照) | HCST Others Human 人 HCST / DAP10 人細胞裂解液 (陽性對照) |
細胞 人腦微血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/duck/Hunan/795/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H037人結腸平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠外周血白原代細胞生長激素誘導跨膜蛋白抗體（真皮源性蛋白2） |
ULBP1 Others Human 人 ULBP1 / RAET1 / N2DL1 人細胞裂解液 (陽性對照) | Kyse510 人食管癌細胞 |
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2 | THP1-Blue (穩(wěn)定株)人單核細胞 THP1-Blue (stable sain) in human monocytes 1640+10% FBS(熱滅活)+200ug/ml Zeocin+0.05mM β-ME |
CNPY2 Others Human 人 CNPY2 人細胞裂解液 (陽性對照) | 整合素αM抗體Integrin αM |
酸化離子通道蛋白Kv1.3抗體 | BC3H1(小鼠腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人表皮角質細胞-HEK-a |
共濟失調(diào)7樣蛋白3B抗體 | 細胞PAS結構域蛋白3抗體 |
GDNF家族受體α3抗體 GFR α3 | CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網(wǎng)