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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠三叉元采用消化法結(jié)合元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠三叉元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠三叉神經(jīng)元原代細胞 | 組織來源 | 三叉神經(jīng)組織 |
英文名稱 | Mouse Trigeminal Neuron Cells | 貨號 | YS-01X7734 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠三叉元細胞分離自三叉組織；三叉為粗大的混合性腦，含一般軀體感覺和特殊內(nèi)臟運動兩種纖維。其特殊內(nèi)臟運動纖維起于腦橋中段的三叉運動核，纖維組成三叉運動根，由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦，位于感覺根下內(nèi)側(cè)，后進入三叉第3支下頜中，經(jīng)卵圓孔出顱，隨下頜分支分布于咀嚼肌等。運動根內(nèi)還含有三叉中腦核有關(guān)的纖維，主要傳導咀嚼肌的本體感覺。三叉內(nèi)以軀體感覺纖維為主，這些纖維的細胞體位于三叉節(jié)（半月節(jié)）內(nèi)，該節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉壓跡處，為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉節(jié)由假單極元組成，其中樞突集中構(gòu)成了粗大的三叉感覺根，由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦，止于三叉諸感覺核，其中傳導痛溫覺的纖維主要終止于三叉脊束核；傳導觸覺的纖維主要終止于三叉腦橋核。三叉節(jié)細胞的周圍突組成三叉三大分支，即第1支眼、第2支上頜、第3支為下頜。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內(nèi)、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等，傳導痛、溫、觸等多種感覺。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
HGC-27人胃癌細胞 細胞，HelaS3細胞 ES-2(卵巢透明細胞癌細胞) | 核分布基因E同源蛋白1抗體 |
Tafazzin蛋白抗體 | 嘧啶c氧化酶10抗體 |
綠色熒光蛋白抗體 | 蛋白質(zhì)酪激酶JAK2抗體 |
細胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN6抗體 | 前列腺特異性抗原單克隆抗體(包被) |
信號轉(zhuǎn)導蛋白亞基8抗體 | 脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白7抗體 |
人小細胞肺癌;NCI-H2227 | 小鼠胚胎成纖維細胞;PA317 |
LTEP-P細胞，人小細胞肺癌細胞 小鼠前成骨細胞,MC-3T3細胞 CL-0130K-562(人慢性骨髓性白血病細胞)5×106cells/瓶×2 | TF-1(人血液白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 |
小鼠角膜內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL | IL25 Protein Human 重組人 IL25 蛋白 (Fc 標簽) |
CL-0137NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纖維5×106cells/瓶×2 | CL-0261BC-022(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
NCI-H929-UBC-EGFP(穩(wěn)定株)人骨髓瘤細胞 NCI-H929-UBC-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(熱滅活) | 小鼠三叉神經(jīng)元原代細胞蛋白質(zhì)酪激酶JAK2抗體 |
黑色素細胞生長添加物(不含TPA)MelGS-2 | RLF, 大鼠淋巴成纖維細胞 STJ.EPI.H7細胞 COS-1(SV40 轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞) |
CNE-2Z(人鼻咽癌細胞) 5×106cells/瓶×2 原代心肌細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml | 細胞 |
CM-M035小鼠肝動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL | 碳酸酶6抗體 |
富含蛋白15抗體 | 人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810] |
原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體 | 胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體 |
酪蛋白激酶Fyn（同步原基因）抗體 | 人小細胞肺癌;NCI-H2227 |
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