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詳細介紹
小鼠睪丸間質(zhì)原代細胞
小鼠睪丸間質(zhì)細胞分離自睪丸組織；睪丸間質(zhì)細胞成群分布在曲精小管之間，胞體呈圓形，橢圓形或不規(guī)則形，胞體較大，直徑約20μm，胞質(zhì)呈嗜酸性，細胞核呈圓形或卵圓形，常位于中央，染色較淡，有1～2個核仁線粒體多，呈管嵴狀，無分泌顆粒。從青春期開始，睪丸間質(zhì)細胞受垂體前葉嗜堿性細胞分泌的間質(zhì)細胞刺激素（黃體生成素）的作用，能合成分泌雄性激素，可促進的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育，以及維持第二性征和性功能。
英文名稱 | Mouse Testicular Mesenchymal Cells | 組織來源 | 睪丸 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7915 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠睪丸間質(zhì)細胞
組織來源：睪丸
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠睪丸間質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的小鼠睪丸間質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的小鼠睪丸間質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
MuM-2C細胞， 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞 赭綠青霉 小鼠成纖維細胞;φ2 | 果膠酶抗體 |
RNA結(jié)合蛋白15抗體 | 細胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體 |
0脂?；嫉鞍拙厶?span>-3抗體 | 蛋白激酶受體B1+B2抗體 |
囊泡膜蛋白1抗體 | 平足蛋白抗體(淋巴管內(nèi)皮細胞蛋白) |
鋅指蛋白717抗體 | 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體 |
ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標簽) | 人臍動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
3T3細胞，小鼠成纖維細胞 COLO 205(結(jié)腸癌細胞) 人腎透明細胞癌;Caki-1 | CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標簽) |
肺泡上皮細胞培養(yǎng)基AEpiCM-prf | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0903 |
人支氣管平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | CL-0220STO(小鼠胚成纖維細胞)5×106cells/瓶×2 |
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-6 羊膜細胞，WISH細胞 786-O [786-0](腎透明細胞腺癌細胞) | 小鼠睪丸間質(zhì)原代細胞蛋白激酶受體B1+B2抗體 |
狗肺成纖維樣細胞;DogL1 | BE(2)C細胞，人母細胞瘤細胞 乙型溶血性鏈球菌 人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1 |
CDH4 Others Human 人 R-Cadherin / CDH4 人細胞裂解液 (陽性對照) | Hce-8693(人盲腸腺癌細胞(未分化)) 5×106cells/瓶×2 |
Lewis瘤 肺癌 | 酸性核糖體0蛋白P2抗體 |
分泌性蛋白RSPO1抗體 | 人腎臟上皮細胞HREpiC |
抑制素βB/Inhibin β B抗體 | 半蛋白酶抑制劑7抗體 |
口蹄疫病毒A型抗體(N端) | ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標簽) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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