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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肝非實(shí)質(zhì)采用取肝臟灌流、膠原酶消化、密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肝非實(shí)質(zhì)經(jīng)過(guò)檢測(cè)，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠肝非實(shí)質(zhì)原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 肝組織 |
英文名稱 | Mouse Hepatic Nonparenchymal Cells | 貨號(hào) | YS-01X7709 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞具有肝功能的單位，是肝臟的基本組成單位之一。肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞是指除了肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞之外的細(xì)胞，主要包含了肝竇內(nèi)皮細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞、肝枯否細(xì)胞。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
操作步驟：
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
人食管癌細(xì)胞;EC109 大鼠腦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體 |
Rho相關(guān)結(jié)構(gòu)域BTB蛋白質(zhì)1抗體 | 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白抗體 |
0脂酰肌醇結(jié)合網(wǎng)格蛋白組裝蛋白抗體 | 蛋白激酶R抗體 |
母細(xì)胞瘤抑瘤蛋白1抗體 | 嘌呤嘧啶核酸內(nèi)切酶2抗體 |
鋅指蛋白598抗體 | 基質(zhì)金屬蛋白酶-17抗體 |
PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化) | AAV-293 人胚腎細(xì)胞 |
CL-0214SK-N-SH(人母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 |
動(dòng)物上皮細(xì)胞培養(yǎng)基EpiCM-a-prf | 豬腎細(xì)胞;LLC-PK1 |
CL-0195RH-35(大鼠肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | CL-0218SPC-A-1(人肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
NCI-H1299細(xì)胞，人肺癌細(xì)胞 人胚腎上皮細(xì)胞,HK-2C細(xì)胞 真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 小鼠肝非實(shí)質(zhì)原代細(xì)胞蛋白激酶R抗體 |
狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1 | NCI-H661人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H661 large cell lung cancer cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS |
SFTPD Others Cynomolgus 食蟹猴 SFTPD / COLEC7 / Collectin-7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0904 |
CM-M090小鼠前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體 |
分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體 | 人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞RNAHRGEC miRNA5 μg |
抑制素A/Inhibin α抗體 | 白血病抑制因子受體抗體 |
口腔癌高表達(dá)的蛋白1抗體 | PC-12(低分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化) |
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