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詳細(xì)介紹
兔脂肪間充質(zhì)干原代細(xì)胞
兔脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細(xì)胞群，具有自我更新能力和多向分化潛能，被稱為脂肪組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞，簡稱脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞。與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相比，在來源、細(xì)胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似。但是，脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞更易獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，且獲取過程中對機體損傷更小，是更為理想的自體干細(xì)胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞以梭形為主要形態(tài)，BrdU可標(biāo)記其細(xì)胞核。
英文名稱 | Rabbit Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells | 組織來源 | 脂肪組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7116 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞
組織來源：脂肪組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的兔脂肪間充質(zhì)干采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的兔脂肪間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S3 | 胰島素樣生長因子I受體抗體 |
凋亡誘導(dǎo)受體PLEKHG5抗體 | 病毒包膜糖蛋白E2抗體 |
果糖胺-3激酶抗體 | 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體 |
組織蛋白酶E抗體 | Notch信號通路Delta樣配體1抗體 |
20號染色體開放閱讀框144抗體 | 乳腺癌增強蛋白抗體 |
CBLC Others Human 人 Cbl-c / CBL-3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A | CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
SCARB2 Others Mouse 小鼠 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
SERPINA7 Others Human 人 SerpinA7 / TBG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | BT-474細(xì)胞，人導(dǎo)管瘤細(xì)胞 轉(zhuǎn)化的豚鼠胎體細(xì)胞,104C1細(xì)胞 甲狀腺癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml |
CM-R045大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 兔脂肪間充質(zhì)干原代細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體 |
NCI-295R細(xì)胞，人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞TCM15,S180細(xì)胞 CL-0226SW626(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3 |
CM-H096人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系) 5×106cells/瓶×2 SHZ-88(大鼠癌細(xì)胞) | 1號染色體開放閱讀框195抗體 |
轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白4抗體 | L-6TG細(xì)胞，肌母細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,JCA-1細(xì)胞 人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5 |
堿性亮拉鏈蛋白BZW1抗體 | NYS48蛋白抗體 |
G蛋白偶聯(lián)受體71抗體 | CBLC Others Human 人 Cbl-c / CBL-3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
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