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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
实验室分离的兔阴道壁成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
实验室分离的tu阴道壁成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 兔阴道壁成纤维原代细胞 | 组织来源 | 阴道 |
英文名称 | Rabbit Vaginal Wall Fibroblast Cells | 货号 | YS-01X8474 |
产品规格 | 5×10?Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
兔阴道壁成纤维细胞分离自阴道组织；阴道位于膀胱、尿道和直肠之间，是一个富有弹性的管状器官。它在人类生殖过程中具有多种生理功能，是连接子宫与外阴的通道，是排出月经血、娩出婴儿的必经之路，也是一个重要的性交器官。阴道壁按组织学由外到内分三层，即黏膜层、肌层和外膜。1）黏膜层由上皮和固有膜组成。上皮较厚，为复层鳞状上皮，从基底层到表层由基底层、旁基底层、中间层和表层组成。没有角化层。阴道粘膜的基底层呈细波纹状起伏。2）肌层由平滑肌组织构成，肌束排列不规则，纵行和环形互相交错。肌束间有较多的结缔组织和弹性纤维。阴道外口有环形的横纹肌称括约肌。3）外膜层为纤维膜，由结缔组织构成，内含丰富的弹性纤维、静脉丛、淋巴管和。大鼠阴道壁成纤维细胞主要分离自外膜层，成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态佳
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
兔阴道壁成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
胃癌组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)/1ml | 白介素13抗体 |
蛋白质精亚型2抗体 | 脑海绵状血管畸形蛋白2抗体 |
盐多谷合成酶抗体 | 错配修复蛋白2抗体 |
7型胶原抗体 | 胎盘和前列腺相关蛋白DLG5抗体 |
20号染色体开放阅读框166抗体 | 热休克蛋白B2抗体 |
IZUMO4 Others Human 人 IZUMO4 / C19orf36 人细胞裂解液 (阳性对照) | 人正常上皮细胞;MCF 10A 人胰腺星状细胞培养基 100mL |
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92 [NK92] | TEK Others Mouse 小鼠 Tie2 / TEK (aa 770-1122) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
769-P(人肾细胞腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H083人脐动脉内皮细胞培养基100mL 人间充质干细胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μg | KEAP1 Others Human 人 KEAP1 / INRF2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
黑人Butt淋巴瘤细胞;RAJI 大鼠气管和支气管上皮细胞培养基 100mL | AGO2 Others Human 人 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
CM-R055大鼠卵巢成纤维细胞培养基100mL | 兔阴道壁成纤维原代细胞错配修复蛋白2抗体 |
IB2 Others Human 人 IB2 / B2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 鱼源细胞 |
人T淋巴细胞白血病细胞;HuT 78 | PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 人细胞裂解液 (阳性对照) |
大额牛皮肤成纤维样细胞;BOS-1 正常肝细胞，L-02细胞 T24(膀胱移行细胞癌细胞) | 12号染色体开放阅读框63抗体 |
层粘连蛋白β2抗体 | LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人细胞裂解液 (阳性对照) |
BCL2相关X蛋白抗体 | 富含亮重复结构域蛋白10抗体 |
葡萄糖转运蛋白1抗体 | IZUMO4 Others Human 人 IZUMO4 / C19orf36 人细胞裂解液 (阳性对照) |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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