详细介绍
人肾动脉内皮原代细胞
人肾动脉内皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾动脉的分支为叶间动脉,穿行于肾柱内,上行至皮质与髓质交界处,形成与肾表面平行的弓状动脉。小叶间动脉向被膜发出毛细血管,并向周围的肾小体发出入球小动脉,进入肾小囊后形成球形的毛细血管网,再汇集成出球小动脉,出肾小体。直小动脉分支形成毛细血管网,再汇合成直小静脉,入弓状静脉、叶间静脉,后汇合成肾静脉经肾门出肾,注入下腔静脉。肾动脉既是肾的营养血管,又是肾的机能血管,与肾泌尿机能密切相关。肾动脉在肾实质内形成两个毛细血管网:肾小球毛细血管网,血压较高,利于血浆滤过形成原尿;球后毛细血管网,血压较低,利于肾小管的重吸收。肾动脉内皮细胞是肾动脉的重要结构细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。肾动脉内皮细胞主要功能有:①在血浆滤过形成原尿的过程中起重要作用,②在肾小管的重吸收过程中起重要作用,③保持凝血和纤溶的动态平衡。
英文名称 | Human Renal Artery Endothelial Cells | 组织来源 | 肾组织 |
产品规格 | 5×10?Cells/T25培养瓶 | 产品货号 | YS-01X7259 |
细胞形态 | 内皮细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
产品名称:人肾动脉内皮细胞
组织来源:肾组织
产品规格:5×10?Cells/T25培养瓶
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
方法简介
公司实验室分离的人肾动脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的人肾动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A | Rhesus antibody Rh GGCX γ-谷氨酰羧化酶抗体 规格 0.2ml |
TIMP-1(Human tissue inhibitor of metal protease 1) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶组织抑制因子1Multi-class antibodies规格: 48T | IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IGC: 非洲爪蟾IGC抗体 1ml | C1q(Human Anti-Complement 1q antibody) ELISA Kit 人抗补体1q抗体 96T |
Rhesus antibody Rh rhIL-18 细胞介素18抗体 规格 0.1ml | Anti-Phospho-Stathmin (Ser38)/FITC 荧光素标记0酸化原癌基因蛋白18抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser262) 0酸化微管相关蛋白抗体 规格 0.1ml | BMPR- II (Mouse Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ 96T |
C6, 大鼠脑胶质瘤细胞 | 豚鼠心肌细胞;GP-H1 |
3T6-Swiss albino细胞,胚胎成纤维细胞 人胰腺癌细胞,CaPan-Ⅱ/Capan-2细胞 CM-M040小鼠肝窦内皮细胞培养基100mL | 正常大鼠肾细胞;NRK |
成纤维细胞生长添加物(不含动物成分)FGS-acf | EB病毒转化的人B淋巴细胞;Mao |
MS1 小鼠胰岛内皮细胞 | EndoFectagen? 内皮细胞转染试剂盒 |
白牦牛皮肤细胞;Yak-2 横纹肌瘤细胞,A673细胞 NAMALWA(Butt's 淋巴瘤细胞) | 人肾动脉内皮原代细胞C1q(Human Anti-Complement 1q antibody) ELISA Kit 人抗补体1q抗体 96T |
白介素-2转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3/VP16-IL-2 | CTSE Others Mouse 小鼠 CTSE / Cathepsin-E 人细胞裂解液 (阳性对照) |
EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人细胞裂解液 (阳性对照) | CM-H047人肝窦内皮细胞培养基100mL |
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 | Rhesus antibody Rh APOA5 载脂蛋白A5抗体 规格 0.2ml |
beta endorphin: β-内啡肽/β endorphin抗体 0.1ml | 大额牛肾细胞;BFR-K1 |
Anti-VWF/FITC 荧光素标记血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Porimin: 前细胞胀亡受体诱导膜损伤蛋白抗体 0.2ml |
Anti-CD170/Siglec-5/FITC 荧光素标记唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素5抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | C6, 大鼠脑胶质瘤细胞 |
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。