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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
公司实验室分离的人尿道上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的人尿道上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 人尿道上皮原代细胞 | 组织来源 | 尿道组织 |
英文名称 | Human Urethral Epithelial cells | 货号 | YS-01X7269 |
产品规格 | 5×10?Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
人尿道上皮细胞分离自尿道管组织；尿道是从膀胱通向体外的管道。尿道上皮细胞主要功能：①尿道上皮细胞排列在膀胱表面，它是由高可塑性和具有多种功能特殊类型的细胞组成；②上皮细胞组成膀胱的防御系统与病原体接触，它们具有多种防御机制来阻止病原体粘着，保持泌尿器溶解物的不渗透性；③膀胱上皮细胞表达雌激素α、β受体，上皮生长因子受体和纤维母细胞生长因子受体，在损伤和感染时，这些受体对膀胱上皮细胞起着重要作用；④能释放许多细胞因子、免疫系统介质。
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
U-373MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒构建稳定株)人脑胶质瘤细胞 U-373MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells DMEM+10% FBS | Rhesus antibody Rh Ghrelin 28 脑肠肽抗体 规格 0.1ml |
P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit 人P53Multi-class antibodies规格： 48T | IgG/Cy7 Cy7标记的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IGF1R： 胰岛素样生长因子1受体抗体 0.1ml | GP-MM(Mouse Glycogen phosphorylase MM)ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶MM 96T |
Rhesus antibody Rh Ribonuclease Inhibitor 核糖核酸酶抑制因子1抗体 规格 0.2ml | Anti-Phospho-Lamin A/C (Ser22) /FITC 荧光素标记0酸化核纤层蛋白A/C抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr181) 0酸化微管相关蛋白抗体 规格 0.1ml | IL-27(human Interleukin 27) ELISA Kit 人白介素27 96T |
IL2 Protein Mouse 重组小鼠 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白 | CM-R008大鼠支气管成纤维细胞培养基100mL |
小鼠肾足细胞;Mouse podocyte 小鼠肝内胆管上皮细胞培养基 100mL | MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 Mouse |
BT474 人导管癌细胞 | MSTN Protein Mouse 重组小鼠 GDF-8 / Myostatin / MSTN 蛋白 (Fc 标签) |
II型胶原酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL | 硝基苯酸(p)酸酶检测试剂盒p |
WI-38人胚肺细胞 WI-38 in human embryo lung cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS | 人尿道上皮原代细胞GP-MM(Mouse Glycogen phosphorylase MM)ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶MM 96T |
人主动脉内皮细胞RNAHAEC miRNA5 μg | Sars结构蛋白表达株;293sars181A 人膀胱上皮细胞培养基 100mL |
CD70 Others Rat 大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 人细胞裂解液 (阳性对照) | CM-H033人肠微血管内皮细胞培养基100mL |
人胚胎，皮肤，肌肉;M-7 | Rhesus antibody Rh APOE/Apo E2 载脂蛋白E抗体 规格 0.1ml |
phospho-B-Raf (Ser444)： 0酸化B-Raf抗体 0.1ml | 人海马元 |
Anti-Smad4/FITC 荧光素标记Smad4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | PEBP2B： 多瘤病毒增强了结合蛋白2β抗体 0.1ml |
Anti-CD155/PVR/FITC 荧光素标记CD155抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | IL2 Protein Mouse 重组小鼠 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白 |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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