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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
公司实验室分离的人卵巢微血管内皮采用胶原酶-蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的人卵巢微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 人卵巢微血管内皮原代细胞 | 组织来源 | 卵巢组织 |
英文名称 | Human Ovarian Microvascular Endothelial Cells | 货号 | YS-01X7660 |
产品规格 | 5×10?Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
人卵巢微血管内皮细胞分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7～9微米，数量极多，成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成，厚约0.5微米?；ね饷嬗斜〔憬岬拮橹?，其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的微血管由一个内皮细胞围成管腔，较粗的微血管由2～3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、组织和结缔组织中的微血管，内皮细胞间为缝隙连接（缝隙宽150埃），称连续微血管。血管内皮细胞在器官和组织的结构和功能上起着非常重要的作用。并与多种疾病的发生与发展有关。近年来血管内皮细胞在炎症、休克等一系列病理生理改变中的重要性愈来愈受到人们的重视。研究发现，不同来源的内皮细胞在生物学特征、结构和功能等方面均存在一定差别，而同是微血管内皮细胞，它们又存在器官和组织的特异性。
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
A549[A-549]细胞，肺癌细胞 人肝癌细胞,SMMC-7721细胞 T-104BII型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL | Rhesus antibody Rh GHRF/GHRH 生长激素释放激素抗体 规格 0.1ml |
MC Ab(Human melanocyte antibody) ELISA Kit 人黑色素细胞抗体Multi-class antibodies规格： 48T | IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml |
IGFBP5： 胰岛素样生长因子结合蛋白5抗体 0.1ml | AHA(Human anti-Histone antibody) ELISA Kit 人抗组蛋白抗体 96T |
Rhesus antibody Rh RIL 抑癌基因PDLIM4抗体 规格 0.1ml | Anti-lamin B/FITC 荧光素标记核纤层蛋白B抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr212) 0酸化微管相关蛋白抗体 规格 0.1ml | IL-28(human Interleukin 28) ELISA Kit 人白介素28 96T |
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12] | B95-8 绒猴EBV转化的白细胞 |
CL-0190RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2 | CSC, 小鼠心肌细胞 |
人皮肤成纤维样细胞;HSF2 | 人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1 |
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1 | β-半乳糖苷酶比色检测试剂盒GalC |
豹猫皮肤成纤维样细胞;LCS5 大鼠肝细胞，BRL 3A细胞 NBLE细胞，新生牛眼晶体上皮细胞 | 人卵巢微血管内皮原代细胞AHA(Human anti-Histone antibody) ELISA Kit 人抗组蛋白抗体 96T |
肝动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) | 人脂肪细胞-内脏(HPA-v)(1×106 ) MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞 Human |
IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人细胞裂解液 (阳性对照) | CM-H030人外周血白细胞培养基100mL |
人胚胎，皮肤，肌肉;M-22 | Rhesus antibody Rh APOE3 载脂蛋白E3抗体 规格 0.2ml |
PNK1： 多聚合苷酸激酶30酸化酶抗体 0.2ml | 人子宫成纤维细胞培养基 100mL |
Anti-Selenoprotein W/FITC 荧光素标记硒蛋白W抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | Profilin 2： 前纤维蛋白2抗体 0.1ml |
Anti-CD147/EMMPRIN/FITC 荧光素标记细胞外基质金属蛋白酶诱导因子抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12] |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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