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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
公司实验室分离的人肝星形采用混合酶灌流消化、低速离心、密度梯度离心制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的人肝星状经α-SMA、Desmin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 人肝星状原代细胞 | 组织来源 | 肝脏组织 |
英文名称 | Human Hepatic Stellate Cells | 货号 | YS-01X7184 |
产品规格 | 5×10?Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
人肝星形细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝星形细胞（HSC）又名肝贮脂细胞、A贮存细胞、窦周细胞、Ito细胞等，是肝脏细胞外基质的主要来源。HSC在激活后可进一步转化为肌成纤维细胞样细胞，各种可导致肝纤维化的因素均将HSC作为终靶细胞。正常情况下，HSC处于静止状态，当肝脏发生炎症反应或受到机械刺激等损伤时，HSC的表型由静止型转变为激活型，激活的HSC可通过增生和分泌细胞外基质参与肝纤维化的形成及肝内结构的重建，此过程也是肝纤维化的中心环节。肝星形细胞分布于肝脏的Disse间隙内，是合成、分泌细胞外基质的主要来源，在肝纤维化的发生中处于重要地位。肝星形细胞是肝脏的间充质细胞，约占肝脏细胞总数的8%-13%。作为肝脏合成细胞外基质的主要细胞群，肝星形细胞不仅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等细胞外基质成分，合成一定量的胶原酶以维持正常的基底膜结构，还能通过其突起的收缩参与肝窦的微循环调节。此外，肝星形细胞能通过合成肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子等促进肝细胞增殖和肝再生。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
Calu-6细胞，人肺癌细胞系(未分化) 大鼠肝星形细胞,CFSC-2G细胞 CM-M097小鼠皮下脂肪细胞培养基100mL | Apaf1 Interacting Protein： 凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗体 0.2ml |
Anti-FLAG Tag (NT) FLAG Tag标签抗体(N端)Multi-class antibodies规格： 0.1ml | Rhesus antibody Rh ABI2 抑制基因ABI2/精酪蛋白激酶结合蛋白抗体 规格 0.2ml |
Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC 荧光素标记半胱蛋白酶8相关蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh IFNA21/IFNA F 干扰素α21抗体 规格 0.2ml |
AR Alpha1( Alpha1-adrenergic receptor) α1能受体抗原 0.5mg | Adenovirus hexon protein： 腺病毒六邻体蛋白抗体 0.2ml |
sIgA/Cy3 Cy3标记的兔抗人分泌型IgA 0.1ml | Rhesus antibody Rh FAM36A FAM36A蛋白抗体 规格 0.2ml |
SK-BR-3(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | 牛陀螺状细胞;BT |
CHL/IU[CHL-11]细胞，中国仓鼠肺细胞 人胰腺癌细胞,PANC-1细胞 CM-R085大鼠表皮角化细胞培养基100mL | 大鼠癌细胞;SHZ-88 |
CM-R118大鼠虹膜色素上皮细胞培养基100mL | 小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-L1 |
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS2 | 大耳山羊皮肤细胞;LDG-3 |
HNE2, 人鼻咽癌细胞系 NIH SWISS小鼠胚细胞,NIH3T3细胞 A673(横纹肌瘤细胞) | 人肝星状原代细胞Rhesus antibody Rh IFNA21/IFNA F 干扰素α21抗体 规格 0.2ml |
大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1) | LIF Others Mouse 小鼠 LIF 人细胞裂解液 (阳性对照) |
CM-M124小鼠脉络膜血管细胞培养基100mL | 支气管成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) |
GBC-SD, 人胆囊癌细胞 | Rhesus antibody Rh IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的兔抗长爪沙鼠IgG 规格 0.1ml |
大鼠抗IVIgG抗体ELISA Kit 大鼠抗IVIgG抗体 96T | EFNB2 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 标签) |
CD177/NB1 peptide 嗜粒细胞抗原CD177抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg | SHBG(Human sex hormone-binding globulin) ELISA Kit 人性激素结合球蛋白Multi-class antibodies规格： 48T |
Myosin-XVIIIb： 肌球蛋白XVIIIb抗体 0.2ml | SK-BR-3(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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