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详细介绍
本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！
细胞属性：
方法简介
公司实验室分离的人肝窦内皮采用混合酶灌流消化、反复低速离心、密度梯度离心法，并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测
公司实验室分离的人肝窦内皮经CD31、CD14免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 人肝窦内皮原代细胞 | 组织来源 | 肝脏组织 |
英文名称 | Human Hepatic Sinusoidal Endothelial Cells | 货号 | YS-01X7186 |
产品规格 | 5×10?Cells/T25培养瓶 | 用途 | 仅供科研实验 |
细胞简介：
人肝窦内皮细胞细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝窦内皮细胞（SEC）是肝脏内所占比例高的非实质细胞，位于肝窦腔与肝细胞之间，具有物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于拥有一般细胞所没有的窗孔结构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性，从而达到快速交换各种大小分子的目的。肝在遭到多种病原侵袭时，肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失，内皮下基膜形成，产生类似于连续型毛细血管的结构，这一过程称为肝窦毛细血管化。它由多种因素引起，其过程极复杂，在多种肝病的发病前期阶段均有出现，近年来受到广泛关注。
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司产品：
Pt K1细胞，长鼻袋鼠肾细胞 人胰腺腺癌细胞,Panc 10.05细胞 CM-M095小鼠成年表皮角质形成层细胞培养基100mL | Rhesus antibody Rh GIMAP2 GTP酶IMAP家族成员2抗体 规格 0.2ml |
Human Oncogene Protein p190/bcr-abl ELISA Kit 人癌基因蛋白质p190/bcr-ablMulti-class antibodies规格： 48T | PE PE标记的兔抗亲和素 0.1ml |
IL-2： 白介素2抗体(大、小鼠) 0.2ml | t-PA ELISA Kit 大鼠组织型纤溶酶原激活剂 96T |
Rhesus antibody Rh RIP3 受体结合丝苏激酶3抗体 规格 0.2ml | Anti-LEF-1/FITC 荧光素标记淋巴增强因子-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Phospho-Tie2 (Ser1119) 0酸化血管生成素受体2抗体 规格 0.1ml | sEPCR(Mouse soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 小鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体 96T |
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1 | 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA |
AR42J细胞，人胰腺细胞 人皮肤成纤维细胞系,BJ细胞 小鼠母细胞瘤细胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] | HT-29(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
人甲状腺滤泡上皮细胞培养基 100mL | PPBP Protein Human 重组人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 标签) |
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-C | 小鼠肠巨噬细胞培养基 100mL |
Malmc细胞，人皮肤纤维微细胞系 光滑念珠菌 杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F3 | 人肝窦内皮原代细胞t-PA ELISA Kit 大鼠组织型纤溶酶原激活剂 96T |
草鱼肝脏细胞;L8824 | 人胚胎绒毛细胞(HAF)(1×106 ) 细胞名称 种属 |
IL23 Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) | CM-H021人前列腺平滑肌细胞培养基100mL |
IFNA10 Protein Human 重组人 Ierferon alpha 10 / IFNA10 蛋白 (Fc 标签) | Rhesus antibody Rh APP/ABPP APP/ABPP淀粉样肽前体蛋白抗体 规格 0.1ml |
BRSK1： 丝酸/苏酸蛋白激酶SAD-B抗体 0.2ml | 恒河猴肾细胞;LLC-MK2 |
Anti-VSIG4 /FITC 荧光素标记T淋巴细胞负调节蛋白之一抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | PAFAH： 脂蛋脂酶A2抗体 0.1ml |
Anti-CD141/FITC 荧光素标记凝血调节蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml | 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1 |
操作步骤：
1.将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
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