詳細介紹
人腸動脈內(nèi)皮原代細胞
人腸動脈內(nèi)皮細胞分離自腸動脈;腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。
英文名稱 | Human Intestinal Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7137 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:人腸動脈內(nèi)皮細胞
組織來源:腸組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的人腸動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人腸動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
HCPEpiC細胞,人脈絡(luò)叢上皮細胞 小鼠淋巴瘤細胞,Nb2-11細胞 人前脂肪細胞-皮下cDNAHPA-s cDNA | Rhesus antibody Rh GIMAP6 GTP酶IMAP家族成員6抗體 規(guī)格 0.2ml |
Apaf-1(Human apoptosis protease activating factor-1) ELISA Kit 人凋亡蛋白酶激活因子1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗親和素 0.1ml |
IL-6: 白介素6 0.1ml | TF ELISA Kit 大鼠組織因子 96T |
Rhesus antibody Rh RISC/Serine carboxypeptidase 1 絲羧肽酶1抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-KSR1/FITC 熒光素標(biāo)記Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Phospho-TLK1(Ser695) 0酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml | ADAMTS13/vWF-cp ELISA Kit 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶 96T |
PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細胞) 5×106cells/瓶×2 | HCT-8 人回盲腸癌細胞 |
786-O [786-0]人腎透明細胞腺癌細胞 786-O [786-0] human renal clear cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | TNF Protein Canine 重組狗 TNF-alpha / TNFA / TNFSF1A 蛋白 |
人急性單核細胞白血病細胞;THP-1 | 801-D (人巨細胞性肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
腸靜脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | 小鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
FIP293細胞,人胚腎細胞(亞系克隆) 貓腎細胞,F81細胞 CL-0276H-97(人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人腸動脈內(nèi)皮原代細胞TF ELISA Kit 大鼠組織因子 96T |
肺微血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SCN3B Others Human 人 SCN3B 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H017人上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
ANGPTL2 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL2 / Angiopoietin-like 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | Rhesus antibody Rh APPL1 銜接因子蛋白含pH域0酸酪結(jié)合域和亮拉鏈蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml |
BCAS1: 癌相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml | 草魚腎細胞;GIK |
Anti-TLR4/FITC 熒光素標(biāo)記Toll樣受體4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Pan-ras: Pan ras抗體 0.1ml |
Anti-CD137/TNFRSF9/FITC 熒光素標(biāo)記CD137抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細胞) 5×106cells/瓶×2 |