詳細介紹
大鼠腎皮質(zhì)上皮原代細胞
大鼠腎皮質(zhì)上皮細胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。
英文名稱 | Rat Renal Cortical Epithelial Cells | 組織來源 | 腎組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7248 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠腎皮質(zhì)上皮細胞
組織來源:腎組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠腎皮質(zhì)上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠腎皮質(zhì)上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
大鼠棕櫚?;さ鞍?span>2(MPP2)試劑盒 ,英文名: MPP2 ELISA Kit
Ma beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒
Mousesolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanLinkerforactivationofTcell,LATELISAKit人T細胞活化連接蛋白
土壤細菌DNA分離試劑盒50次
ELISAKitAECA大鼠抗內(nèi)皮細胞抗體
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human brain derived neuroophic factor (BDNF) ELISA Kit 人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒
Humanhighmobilitygroupprotein17,HMG-17ELISAKit 人高速泳動蛋白17(HMG-17)試劑盒 96T/48T 進口分裝
GuineaPigIerleukin1receptoraagonist,IL-1ra試劑盒豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性化學發(fā)光法定量試劑盒20次
Mousecarbonicanhydrase,CAELISAKit小鼠酶(CA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
山羊促生長激素釋放激素(GHRH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
山羊生長激素釋放多肽(GHRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
山羊白介素4(IL-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
山羊白介素10(IL-10)ELISAKit ELISA. 96T/48T
TNFRSF1A重組人 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2 (IGFBP2)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
HAVCR1 Protein Human 重組人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白 (aa 1-135, His 標簽)
ACNB Protein E. coli 重組大腸桿菌 acnB 蛋白
CRP Others Rat 大鼠 CRP / C-reactive 人細胞裂解液 HA Others H5N9 甲型流感 H5N9 (A/chicken/Italy/22A/1998) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 CM-R078 小鼠原代三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞 小鼠原代肺微血管內(nèi)皮細胞
大鼠腎皮質(zhì)上皮原代細胞Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白:納曲酮偶聯(lián)血藍蛋白 0.5mgNatrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯(lián)牛血清白蛋白:納曲酮偶聯(lián)血藍蛋白
CREB3L1 Protein Human 重組人 CREB3L1 / OASIS 蛋白 (aa 396-519, His 標簽)
PDCD1重組狗 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 Protein
NTRK1 Protein Mouse 重組小鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽)
SIRPG重組人 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 蛋白 Protein