詳細(xì)介紹
大鼠尿道上皮原代細(xì)胞
大鼠尿道上皮細(xì)胞分離自尿道管組織;尿道是從膀胱通向體外的管道。尿道上皮細(xì)胞主要功能:①尿道上皮細(xì)胞排列在膀胱表面,它是由高可塑性和具有多種功能特殊類型的細(xì)胞組成;②上皮細(xì)胞組成膀胱的防御系統(tǒng)與病原體接觸,它們具有多種防御機(jī)制來阻止病原體粘著,保持泌尿器溶解物的不滲透性;③膀胱上皮細(xì)胞表達(dá)雌激素α、β受體,上皮生長(zhǎng)因子受體和纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體,在損傷和感染時(shí),這些受體對(duì)膀胱上皮細(xì)胞起著重要作用;④能釋放許多細(xì)胞因子、免疫系統(tǒng)介質(zhì)。
英文名稱 | Rat Urethral Epithelial Cells | 組織來源 | 尿道組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7261 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠尿道上皮細(xì)胞
組織來源:尿道組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尿道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尿道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
兔白細(xì)胞介素-35(IL-35)試劑盒
Rat acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit 大鼠乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒
HumanHerpessimplexvirusⅡaibody,HSVⅡ-AbELISAKit 人單皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanglycogensyhasekinase,GSK試劑盒人糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒
組織蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量試劑盒20次
Humanmonoamineoxidase,MAOELISAKit人單胺氧化酶(MAO)試劑盒
植物K1(VK1)ELISA 試劑盒
Human ai heparin PF4 complex aibody /HIT (HIT) ELISA Kit 人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)試劑盒
PorcineCoisolELISAKit 豬(Coisol)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAFP-L2ELISAKit小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2
血液B1高效液相色譜法定量試劑盒20次
Mousethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit小鼠血栓前體蛋白(TpP)試劑盒
植物類黃測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣
植物總酚測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣
植物原測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣
尿酸含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣
TNFRSF10B重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
BrdU (Bromodeoxyuridine 50mgBrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷
ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
ILKAP Protein Human 重組人 ILKAP 蛋白
EPHA7 Protein Rat 重組大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白
CL-0337FO(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人細(xì)胞裂解液 LX-2, 人肝星形細(xì)胞株 小鼠垂體瘤細(xì)胞(分泌促生長(zhǎng)激素分泌激素),GT1.1細(xì)胞 OK(負(fù)鼠(opossum)腎細(xì)胞) 膽道癌組織源性原代細(xì)胞 小鼠原代胃黏膜上皮細(xì)胞 大鼠原代腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
大鼠尿道上皮原代細(xì)胞MAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A 0.5mgMAP1A/Mtap1a(microtubule associated protein 1A) 微管相關(guān)蛋白1A抗原
ALOX15B Protein Human 重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
NT5E重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
WIF1 Protein Mouse 重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL2重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白 Protein
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。