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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的大鼠滑膜成纖維采用混合酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的大鼠滑膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠滑膜成纖維原代細胞 | 組織來源 | 滑膜 |
英文名稱 | Rat Synovial Fibroblast Cells | 貨號 | YS-01X7788 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠滑膜成纖維細胞分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關節(jié)腔內面的內襯結構，各種關節(jié)內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構，同時在各種關節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關節(jié)炎(OA)以關節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?，其病理改變累及關節(jié)的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關節(jié)的退變?；ぜ毎菢嫵苫拥淖畲蠹毎后w，是維持關節(jié)正常功能的重要組織結構，它包埋在顆粒狀無定性的基質中，基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細胞)、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹突細胞樣滑膜細胞)細胞組成?；ぜ毎饕δ埽孩倩ぜ毎a(chǎn)生潤滑液成分，并且與關節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關；②滑膜細胞增生，表現(xiàn)為不依賴于支持物生長，并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節(jié)損壞；③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡中效應因子的一部分。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠滑膜成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA 試劑盒
Rat acidic fibroblast growth factor 1 (aFGF-1) ELISA Kit 大鼠酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)試劑盒
Humanchaperonin10,CPN10ELISAKit 人伴侶蛋白10(CPN10)試劑盒 進口分裝
Humancirculatingimmunecomplex,CIC試劑盒人循環(huán)免疫復合物(CIC)試劑盒
組蛋白H1激酶免疫共沉淀試劑盒10次
Humaudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit人的牛血清白蛋白殘留檢測試劑盒
豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒 ，英文名： TIMP-1 ELISA Kit
Human factor related apoptosis inducing ligand (FASL) ELISA Kit 人凋亡相關因子配體(FASL)試劑盒
MonkeyInsulin,INSELISAKit 猴胰島素(INS)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforbFGF-9ELISAKit大鼠堿性成纖維細胞生長因子9
細菌乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次
rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit兔子白介素4(IL-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
魚糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
魚尿苷二0酸葡萄糖酸轉移酶（UDPGT）試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
魚免疫球蛋白M（IgM）試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
魚類主要組織相容性復合體(MHC)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
CD274重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His 標簽) Protein
CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1 0.5mgCREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 環(huán)腺苷酸應答元件結合蛋白(抗原)
CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 蛋白 (His 標簽) Protein
AK1 Protein Human 重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 (His 標簽)
NTRK3 Protein Mouse 重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 (His 標簽)
Caco-2，人結直腸腺癌細胞 Human STO(小鼠胚成纖維細胞) 615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7712 中國倉鼠肺細胞;V79 卵巢癌細胞，SK-OV-3細胞 WCF細胞，團頭魴尾鰭細胞 T2細胞，轉HLA-2基因B細胞 小鼠癌細胞 小鼠原代椎體終板軟骨干細胞 小鼠原代骨髓巨噬細胞
大鼠滑膜成纖維原代細胞D受體(VDR)重組蛋白 Recombinant Vitamin D Receptor (VDR)
ACVR1B Protein Human 重組人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His 標簽)
PDCD1重組人 PD1 / PDCD1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)
NRG3重組人 NRG-3 / Neuregulin-3 蛋白 Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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