詳細(xì)介紹
大鼠腸巨噬原代細(xì)胞
大鼠腸巨噬細(xì)胞分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。巨噬細(xì)胞屬于免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,令其對病原體作出反應(yīng)。
英文名稱 | Rat Intestinal Macrophage Cells | 組織來源 | 腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7191 |
細(xì)胞形態(tài) | 巨噬細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠腸巨噬細(xì)胞
組織來源:腸組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 (12mM)
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠腸巨噬采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠腸巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA 試劑盒
Rat anaphylatoxin / compleme fragme 4a (C4a) ELISA Kit 大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)試劑盒
HumanactivatedproteinC,APCELISAKit 人活化蛋白C(APC)試劑盒 進(jìn)口分裝
Chickenniicoxide,NO試劑盒雞(NO)試劑盒
載玻片細(xì)胞P35蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFollistatin,FSELISAKit小鼠卵泡抑素(FS)試劑盒
小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)試劑盒
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit 人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
cit瓜規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
腮腺病毒(MuV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
麻風(fēng)桿菌(ML)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
普氏立克次體(RP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
莫氏立克次體(RM)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素
TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白
A-204細(xì)胞,人橫紋肌肉瘤細(xì)胞 兩歧雙歧桿菌 人肝永生化細(xì)胞;THLE-3 F81(貓細(xì)胞) 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 Sars蛋白表達(dá)株,293001A細(xì)胞 NCI-H596 [H596](人肺癌細(xì)胞) CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株) 豬原代腎小球系膜細(xì)胞 大鼠原代胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞
大鼠腸巨噬原代細(xì)胞Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor 0.5mgKiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 轉(zhuǎn)移抑制基因(抗原)
ABHD10 Protein Human 重組人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 標(biāo)簽)
IL2RA重組食蟹猴 IL2RA 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
EGFR Protein Mouse 重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白
CDON重組人 CDON / CDO 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein