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小鼠胚胎成纤维细胞;STO培养

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更新时间:2018-04-26 14:58:03浏览次数:543

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产品简介

小鼠胚胎成纤维细胞;STO培养只能用于科研,不得用于临床。应用公司细胞库细胞株种类齐全:大鼠腹水癌细胞、肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株。细胞状态良好,饱满,光泽度好,*,专业技术指导?;队愦罂蒲杏没В?

详细介绍

细胞名称  小鼠胚胎成纤维细胞;STO培养
形态特性 成纤维细胞样 

品牌 贴壁生长

特征特性 STO是一株继代生长的胚成纤维细胞系,可用于制备饲养层细胞(feeder layers)和其他研究。

培养条件 MEM-EBSS:

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

传代方法 1:

3传代,2-3天传一代  

传代情况 C4

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 

支原体检测 阴性 

STR

同工酶 同工酶鉴定

染色体

使用权限
小鼠胚胎成纤维细胞;STO培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-phospho-PAK1(pSer)/FITC 荧光素标记抗磷酸化p21激活激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Streptavidin/Gold 金标记链霉亲和素(10nm/15nm)Multi-class antibodies规格: 0.3ml

FOSL2抗体 Anti-FOSL2 0.1ml

Goat Anti-rabbit IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗兔IgG 0.1ml

FN3K 英文名称: 果糖胺-3激酶抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Stat4 (Tyr693) 磷酸化信号转导和转录激活因子4抗体 规格 0.1ml

Streptavidin/Gold 金标记链霉亲和素(10nm/15nm)Multi-class antibodies规格: 0.3ml
Plant Human Vitamin C,VC ELISA Kit 植物维生素CMulti-class antibodies规格: 48T

Anti-DOK 2/p56Dok2/FITC 荧光素标记抗人、大、小鼠D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh CXX1/Cerebral protein 5 脑蛋白5抗体 规格 0.2ml

Newcastle disease virus/HRP 鸡新城疫疫苗(鸡瘟4型混合病毒)偶联辣根过氧化物酶 1ml

KT3 tag 英文名称: KT3 tag抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh WIF1 Wnt信号抑制因子1抗体 规格 0.2ml

Anti-DOK 2/p56Dok2/FITC 荧光素标记抗人、大、小鼠D酪氨酸激酶衰减蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Streptokinase 英文名称: 链激酶抗体 0.1ml

eIF3K 英文名称: 真核翻译起始因子3K抗体 0.2ml

激素受体相关蛋白16抗体 Anti-TRA16 0.2ml

Anti-TRA16/FITC 荧光素标记激素受体相关蛋白16抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ITGB4(Tyr1526) 磷酸化整合素β4抗体 规格 0.1ml

PR (Progestogerone receptor) 孕激素受体(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
CA724(Mouse CA724) ELISA Kit 小鼠标志物Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-CK10/RBITC 红色荧光素罗丹明标记细胞角蛋白10抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh DNase II 脱氧核糖核酸酶2抗体 规格 0.2ml

Bovine IgG/RBITC 罗丹明标记IgG 0.3ml

LETMD1 英文名称: 原癌基因2抗体 0.2ml

黄素总量检测试剂盒 96孔/盒 粮食作物(玉米、大米、豆类、花生、麦类等)、饲料、面粉等

Anti-CK10/RBITC 红色荧光素罗丹明标记细胞角蛋白10抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。

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