详细介绍
细胞名称 小鼠肾腺癌细胞;RAG培养
形态特性 变形虫样
品牌 贴壁生长
特征特性 这是一株肾脏-2α细胞株的非回复8-氮杂鸟嘌呤抗性(HPRT-, HGPRT-)克隆。 测试发现缺肢畸形病毒(鼠痘)阴性。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:
2。3天内可长满。
传代情况 P(264+5)
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工
小鼠肾腺癌细胞;RAG培养贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-Phospho-p63 (Ser395) /FITC 荧光素标记磷酸化P63抑制基因抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgG/Biotin 生物素化兔抗马IgGMulti-class antibodies规格: 0.1ml
心肌肌钙蛋白抗体 anti-CTn1 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgM/PE-Cy3 PE-Cy3标记的羊抗小鼠IgM 0.1ml
FLT3L 英文名称: FMS样酪酸激酶3配体抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-YAP1(Ser127) 磷酸化原癌基因Yes相关蛋白1抗体 规格 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG/Biotin 生物素化兔抗马IgGMulti-class antibodies规格: 0.1ml
Plant zeatin riboside,ZR ELISA Kit 植物玉米索核苷Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-DDX4/MVH/FITC 荧光素标记DDX4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Cyclophilin D 亲环蛋白(亲环素)40抗体 规格 0.2ml
human IgA/FITC 荧光素标记人IgA 0.3ml
LAP3 英文名称: 亮酸基肽酶3抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh WRCH-1 WRCH1抗体 规格 0.1ml
Anti-DDX4/MVH/FITC 荧光素标记DDX4抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
SULT1B1 Kit Human 人 SULT1B1 ELISA配对抗体 ELISA
TXNDC11 英文名称: 硫氧还蛋白11抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh P95/NBS1 DNA修复蛋白NBS1抗体 规格 0.2ml
MSLN(mesothelin) 间皮素(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
C8orf4 英文名称: 8号染色体开放阅读框4抗体 0.2ml
Anti-CD36/PAS-4 CD36抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
ISR- Beta ELISA Kit 大鼠胰岛素受体βMulti-class antibodies规格: 48T
Anti-AAK1/FITC 荧光素标记AP2关联激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FMDV Polyprotein (3D polymerase) 口蹄疫病毒 规格 0.2ml
BMPs(Mouse bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白 96T
11-Mar 英文名称: 膜相关环指蛋白11抗体 0.2ml
ALK 英文名称: 间变型淋巴瘤激酶抗体 0.2ml
Anti-AAK1/FITC 荧光素标记AP2关联激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。