详细介绍
1.产品名称:大鼠胰腺星状细胞
2.组织来源:胰腺组织
3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
大鼠胰腺星状细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌生长抑素,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。纤维化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星状细胞(PSC)是胰腺纤维化的主要效应细胞,PSC分离和成功培养是体外研究胰腺纤维化的重要前提。未活性化的PSC胞浆中富含维A脂滴,并表达Desmin蛋白,活化后的PSC则表达α-平滑肌肌动蛋白(alpha-SMA)。PSC具有静息态与激活态两种,并分别具有特异的标志物。静息状态PSC胞质内富含的维生素A脂滴可以被油红O染成红色,阳性表达Desmin。激活状态PSC阳性表达alpha-SMA。油红O染色发现,原代分离的细胞培养6d,胞浆中仍可见明显的脂滴,传代后,橙红色的脂滴颗粒显著减少甚至消失。免疫细胞化学染色显示,细胞接种24h仍然表达Desmin,48h后Desmin基本不再表达。培养48h后绝大多数细胞开始表达alpha-SMA,随着培养时间的增长和传代次数的增加,细胞表达alpha-SMA,而不再表达Desmin,说明细胞活化。提示PSC接种24h后即启动了激活过程,至培养第6d大多数细胞激活,传代后细胞处于高度激活状态。原代胰腺星状细胞可作为慢性胰腺炎新药的细胞筛选模型,目前研究发现:胰腺受损时,在各种刺激因子作用下使胰腺星状细胞活化,导致细胞形态、功能发生变化,促使基质增生、胶原蛋白的大量生成及不规则沉积。
本公司生产的采用胶原酶制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经Desmin、alpha-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息:
DMEM-F12、FBS、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用*培养基(产品货号:CM-R016)作为体外培养的培养基。
T25瓶细胞处理方法
收到细胞后,检查外包装是否完整,细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题,请即时联系。并进行以下操作:
1.75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。
2.将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。
3.预热培养基(含10%胎牛血清,1%双抗)。
4.显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40×,100×,200×各一张)。
5.①若细胞密度较小,无菌操作,去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上,进行传代。
②若细胞密度较大,达到80%以上,将细胞传代培养。
注:
培养瓶里的培养基血清浓度为5%,建议更换成自己配好的新鲜培养基。由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,这时请在拍照后将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基。(这里是针对原来*培养基FBS浓度是10%的情况,如果原来FBS浓度是20%,可以增加到25%FBS浓度) 收到细胞后如细胞状态不佳或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系并提供图片,以便售后处理。7天内反馈,细胞本身问题免费重发如人为原因导致可根据实际情况酌情处理;7天内未接到任何反馈视为合格,不予免费售后
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