详细介绍
大鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)Elisa试剂盒是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
规格:48T 96T
检 测 范 围 :7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 :本试剂盒用于测定山羊血清、血浆及相关液体样本中小反刍兽疫抗体(PPRAb)含量。
标 本 要 求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)Elisa试剂盒试剂及试剂配制
1. 抗原及酶标记抗体
①抗原: IgG
②酶标抗抗体:羊抗鼠IgG-HRP
2.包被液(CBS):Na2CO3 0.8g,NaHCO3 1.46g,水溶解,定容500ml。
3. 封闭液(3%BSA+CBS 或5%牛奶+CBS):含3%牛血清白蛋白(BSA):10mL CBS中加入0.3g BSA。含5%荷兰牛奶:10mL CBS中加入0.5g牛奶 。
4. 洗涤液(PBST 10*):KH2PO4 4g,Na2HPO4·12H2O 58g,NaCl 160g, KCl 4g,Tween-20 10mL 加水定容2L。
5. 洗涤液(1*PBS): PBST:H2O=1:9
6. 底物溶液(4甲基酰苯氨) ①TMB底物缓冲液(0.005mol/LPH3.6醋酸钠-柠檬酸缓冲液):称NaAc·3H2O:1.13g,C6H8O7·H2O :1.05g,用蒸馏水溶解,定容至1000mL,调PH=3.6。 ② TMB底物液:称3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)0.08g 溶于40mL 二甲基亚砜(DMSO)中,加60 mL 甲醇,混匀,加100mL 底物缓冲液,在暗处避光搅拌2小时至溶解,4℃避光保存。 ③H2O2 底物液:取140μL过氧化氢(H2O2)加入200mL底物缓冲液混匀。 ④底物应用液:现用现配,TMB:H2O2=1:1混匀。
7. 终止液:2mol/L H2SO4
大鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)Elisa试剂盒操作步骤
①抗原包被过夜(12h以上): IgG抗原,用包被液(CBS)稀释,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反应板中。4℃放置过夜。 抗原用量:0.1μg*100N/抗原浓度 (N为板数)
②封闭:弃上清 加300μL/孔封闭液,37℃放置2h。
③洗涤:用洗涤液洗3次
④加一抗(待测样品为细胞培养上清):将含单克降抗体的细胞培养上清100μL /孔加到已包被的板上,空白培养基作为阴性对照,已知样品血清(1:200稀释于1%BSA+PBST中)作为阳性对照。37℃恒温箱温育2h。 测免疫效价待测样品为小鼠血清时:采小鼠血液于常温20min左右后放4℃至析出血清,3000r 10min离心。将含抗体的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST连续倍比稀释(按照1:200开始),100μL /孔。每个样品平行做两份,小鼠阴性血清或空白培养基作为阴性对照,已知样品作为阳性对照。37℃恒温箱温育2h。
⑤洗涤:用洗涤液洗5次。
⑥加二抗(酶标抗抗体):羊抗鼠IgG-HRP,用1%BSA+PBST l :10000稀释,100μL/孔, 37℃恒温箱温育1h。
⑦洗涤:用洗涤液洗5次,
⑧显色:加新鲜配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔,37℃恒温箱放置10min,显示蓝色。
⑨终止反应、比色:加30μL/孔H2SO4终止液.颜色变黄;用酶标仪测定450nm 630nm处各孔的吸光值,阳性反应的zui大稀释度为待测样品的效价。
大鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)Elisa试剂盒相关产品如下:
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ZQ0627 人黑色素瘤细胞 5 x 10^5 cells/vial
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ZQ0233 SW579 [SW 579; SW-579]人甲状腺鳞癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0235 TE-1人食管癌细胞 5 x 10^5 cells/via10^5 cells/vialZQ0240 AGS人胃腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
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ZQ0292 HFF人包皮成纤维细胞 5 x 10^5 cells/vial
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ZQ0310 ACT-1人甲状腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
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ZQ0317 KMH-2人甲状腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
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ZQ0324 HCT-15人结直肠腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0325 DLD-1人结直肠腺癌上皮细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0326 NCI-H716 [H716]人结直肠腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0327 COLO 320DM 人结直肠腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0328 T84人结肠腺癌肺转移细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0329 RKO-AS45-1人结肠癌转基因细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0330 RKO-E6人结肠癌转基因细胞 5 x 10^5 cells/vial
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ZQ0332 Hce-8693人盲肠腺癌细胞(未分化) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0333 2V6.11人胚肾细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0334 AAV-293人胚肾细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0335 293 Cells, low passage人胚肾细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0336 OS-RC-2人肾癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0337 SK-NEP-1人肾母细胞瘤细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0338 786-O [786-0]人肾透明细胞腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0339 Caki-1人肾透明细胞癌皮肤转移细胞 5 x 10^5 cells/vial
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ZQ0342 HEC-1-A人子宫内膜腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0343 JEG-3人绒毛膜癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0345 SV-HUC-1人输尿管上皮永生化细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0346 ZR-75-30 人乳腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0347 UM-UC-3人膀胱移行细胞癌 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0348 J82人膀胱移行细胞癌 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0349 SW 780 [SW-780, SW780]人膀胱移行细胞癌 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0350 RT4人膀胱移行细胞乳头瘤细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0351 RWPE-1人正常前列腺上皮细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0352? WPMY-1人正常前列腺基质永生化细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0353 VCaP人前列腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0354 MDA-MB-415人乳腺腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0355 MDA-MB-436人乳腺腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
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ZQ0357 HeLa 229人宫颈癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0358 293T/17人胚肾细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0359 C-33 A人子宫颈癌 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0360 MS751人子宫颈表皮癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0361 ME-180人子宫颈表皮癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0362 RL95-2人子宫内膜癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0363 HCC 94 [HCC941122]人子宫鳞癌细胞(高分化) 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0364 HEC-1-B人子宫内膜腺癌细胞 5 x 10^5 cells/vial
ZQ0365 NIH:OVCAR-3人卵巢癌细胞 5 x 10^5 cells/vial