谷氨酰胺酶是谷氨酰胺代谢中的关键酶。谷氨酰胺是癌细胞代谢中一种重要的氨基酸，谷氨酰胺分解的增加与癌症的发生有关。BioAssay Systems的DGLN-100试剂盒提供了一种便捷的荧光法来测定生物样本中的谷氨酰胺酶活性。在此检测中，邻苯二甲醛与释放的氨反应，荧光强度在λex/em = 415/475 nm处的增加与酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems销售产品谷氨酸酶测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

- 快速安全。检测可在50分钟内完成。非放射性检测。

- 灵敏准确。96孔板检测的线性检测范围为0.66-500 U/L谷氨酰胺酶。

- 方便高效。均质“混合-孵育-测量"型检测?？汕崴勺远刻炜杉觳馐Ц鲅?。

应用

用于定量测定生物样本中的谷氨酰胺酶活性。

试剂盒组成（96孔板，100次检测）

- 检测缓冲液：5 mL

- 20 mM标准品：50 uL

- 20 mM底物：500 uL

- 检测试剂：5 mL

储存条件

试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分储存于-20°C。有效期：收到后6个月。

注意事项

- 试剂仅供研究使用。使用试剂时需遵循实验室试剂的常规注意事项。详细信息请参阅材料安全数据表。

操作步骤

本检测基于动力学反应。为确保孵育时间一致，加入工作试剂（WR）时需迅速，混合需短暂但充分。建议使用多通道移液器。检测可在室温下进行。

试剂准备

- 检测前将所有组分平衡至室温，并在打开前短暂离心试管。每次检测需现配工作试剂（WR）。

酶准备

- 酶应在酶缓冲液中制备，例如20 mM磷酸钾（pH 7.4）。以下协议针对枯草芽孢杆菌来源的谷氨酰胺酶进行了优化。如果使用其他酶，建议实验确定每孔所需的酶的最佳用量。

反应准备

1. 将每个样本的10 uL分别加入到孔板的不同孔中。

2. 通过将每个孔的5 uL 20 mM底物和45 uL检测缓冲液混合，准备足够的工作试剂（WR）用于所有样本孔。

3. 通过向所有样本孔中加入40 uL WR启动反应。在室温下孵育反应30分钟。

4. 向所有孔中加入50 uL检测试剂。轻拍孔板以混合，孵育20分钟后，在λex/em = 415/475 nm处测量荧光强度。

所需材料（但未提供）

移液装置及配件（如多通道移液器）、黑色平底96孔板（如Corning Costar）、离心管和酶标仪。

实验示例

在室温下，使用2 mM谷氨酰胺作为底物，对不同浓度的谷氨酰胺酶进行了30分钟的检测。

文献：

1. Milano, S. K., et al (2022). New insights into the molecular mechanisms of glutaminase C inhibitors in cancer cells using serial room temperature crystallography. Journal of Biological Chemistry, 298(2),

101535.

2. Sugawara, K, Oyama, F. (1981). Fluorgenic reaction and specific microdetermination of ammonia. J. Biochem. 89, 771–774. 

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。

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