全人IgA ELISA试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定（ELISA）用于测定人血清或血浆中的IgA。仅供研究使用。不适用于诊断程序。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO销售产品IgA(人)ELISA试剂盒，96w。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

IgA(人)ELISA试剂盒，96w检测原理：

双抗体夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）的原理如图1所示。在这种测定中，样本中的IgA与吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗IgA抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）偶联的抗IgA抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的IgA形成复合物。经过另一次洗涤步骤后，通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来测定结合的酶。结合酶的量与测试样本中IgA的浓度直接相关；因此，450纳米处的吸光度是测试样本中IgA浓度的量度。测试样本中IgA的量可以从标准曲线中插值得到，并根据样本稀释进行校正。

样本收集和处理

所有血液成分和生物材料应视为潜在危险物。处理和处置时应遵循通用预防措施。如果血液样本出现凝块、严重溶血、脂血或样本完整性存疑，请做好记录并谨慎解释结果。以下列出的样本收集和储存条件仅供参考。样本稳定性未经评估。

血清样本 - 应通过静脉穿刺收集血液。血液凝固后通过离心分离血清。取出血清后立即进行测定或分装后储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融循环。

血浆样本 - 应将血液收集到含有抗凝剂的容器中，然后进行离心。立即进行测定或分装后储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融循环。

已知干扰物质 - 叠氮化物和硫柳汞在高于0.1%的浓度时会抑制酶反应。

样本稀释

测定要求每个样本在使用前进行稀释。每次进行测定时，所有样本应进行双重测定。推荐的稀释比例仅供参考。稀释应基于未知样本的预期浓度，以使稀释后的样本落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本水平，强烈建议在运行整个板之前，先用一个或两个代表性样本进行系列稀释测定。

血清和血浆样本 - 建议起始稀释比例为1:10,000。要制备1:10,000的y本稀释液，将5微升样本转移到495微升1X稀释液中。接下来，将1:100的样本通过将5微升转移到495微升1X稀释液中进行稀释。这得到1:10,000的y本稀释液。每个阶段都要c底混合。

试剂准备

使用前将所有试剂置于室温（16°C至25°C）。

稀释液浓缩液 - 提供的稀释液是5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，4份dH2O）稀释1:5。

洗涤液浓缩液 - 提供的洗涤液是20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，19份dH2O）稀释1:20。浓缩液在储存温度低时可能会形成晶体。稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解晶体。

酶-抗体结合物 - 通过向每个微孔板测试条添加10微升酶-抗体结合物到990微升1X稀释液中，计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量。均匀混合，但要轻柔。避免起泡。

预涂覆ELISA微孔板 - 按提供状态使用。打开箔袋，从袋中取出板。取出在测定中不会使用的所有条和孔，放回袋中并重新密封，连同干燥剂一起。

人类IgA校准液 - 根据批次特定的分析证明书进行准备。

结果计算

从每个孔的值中减去平均背景值（标准零的平均吸光度读数）。

平均每个标准品的双重读数，并使用结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来减少数据，构建标准曲线。也可以使用二阶多项式（二次）或其他曲线拟合；然而，它们对数据的拟合精度会较低。

从标准曲线中插值样本值。校正稀释因子，得出原始样本中的IgA浓度。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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