病毒灭活试验是为了评估各种消毒因子对病毒的杀灭效果，验证消毒因子的病毒灭活能力。这是通过利用有代表性的活病毒及其细胞感染技术，测定消毒因子作用前后样本中病毒的量，以细胞病变作为判断指标，确定各组病毒的感染滴度，观察消毒因子对病毒的灭活效果。病毒灭活试验-第三方CMA检测中心，中科检测提供病毒灭活试验服务，具有P2实验室。

病毒灭活试验的目的:

为了验证病毒在何种消毒条件下可以被有效杀灭，这有助于更好地理解病毒的特性，并为研发抗病毒、疫苗等提供重要依据。同时，病毒灭活试验也是制定科学、严格消毒措施的基础，对于防止病毒传播、保障公共卫生安全具有重要意义。

病毒灭活试验方法包括：

可以采用悬液法和载体法。

悬液法病毒灭活试验的步骤如下：

准备待测消毒剂，用灭菌硬水将其稀释至所需浓度的1.25倍，于20℃±1℃水浴中备用。

取出-80℃低温保存的病毒，室温解冻后，与有机干扰物按照1:1比例混合作为消毒剂灭活试验用病毒悬液。

取上述病毒悬液1份加入4份待检消毒剂，立即混匀并记时。作用至规定时间，立即取出0.1mL，加入经鉴定合格的0.9mL中和剂中混匀；或用经鉴定合格的除药方法处理。

对照组试验：阳性对照组为病毒对照组，观察病毒生长是否良好，病毒滴度是否达到试验要求；阴性对照组用细胞维持液作为阴性对照，观察有无污染，细胞生长是否良好。

终点稀释法：用细胞维持液对待滴定样本做10倍系列稀释，吸取样液100μL，接种于单层细胞培养板上，每个滴度接种4孔。在36℃±1℃放置1h～2h后，取出培养板，更换细胞维持液。继续放入二氧化碳培养箱中（36℃±1℃，5%±1%二氧化碳）培养3-4天，显微镜下观察细胞生长状态，记录细胞病变情况。

载体法病毒灭活试验的步骤如下：

用标准硬水配制消毒液至所需浓度的1.25倍。

中和剂可用PBS为基础，加入对应的中和成分，灭菌后备用。

试验用病毒悬液，取5.2方法制备后病毒悬液，加入等量的有机干扰物质（根据产品说明的使用条件选择30g/L或3g/L BSA)，充分混匀后备用。

中和剂鉴定试验用药浓度应为正式试验浓度的最高浓度，作用时间最短不少于30s。

中和剂鉴定试验分组。

每日观察CPE情况，共5d，测定各组病毒悬液的TCID50对数值。

中和剂的合格判断标准，可参照《消毒技术规范》(2002年版)。

病毒灭活试验标准：

ISO 21702-2019塑料和其他非多孔表面抗病毒活性的测定

ISO 18184-2019纺织品.纺织品抗病毒活性的测定等

《消毒技术规范》2002版

《消毒剂灭活手足口病病毒效果的测试方法》（团体标准）等

GB/T18801-2015空气净化器

GB 21551.3-2010家用和类似用途电器的抗茵、除茵、净化功能空气净化器

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