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核殼色譜柱的固定相填充方式講解

閱讀:577        發(fā)布時間:2019/10/21
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   核殼色譜柱的固定相填充方式講解
  1.加壓法
  加壓法是將填充柱的一端塞好硅烷化的玻璃棉,另一端與填料池連接。先將固定相倒入填料池,填料池的另一端出口與氮氣或空氣鋼瓶的減壓閥連結。對于常見內徑為4.5mm的填充柱,可調節(jié)氣流為30ml/min,將填充池內的固定相壓入填充柱中,同時用木棒輕敲填充柱體使固定相填充均勻。裝柱要求要填充得均勻,緊密,切忌有空隙。固定相填充完畢后,在原來連接填充池的一端塞上硅烷化的玻璃棉,注意這一端應該與色譜儀的進樣室相連接,另一端作為出口端與檢測器相連接,不能接反。
  加壓柱是一種比較好的方法,與常壓柱類似,只不過外加壓力使淋洗劑走的快些。壓力的提供可以是壓縮空氣,雙連球或者小氣泵。特別是在容易分解的樣品的分離中適用。壓力不可過大,不然溶劑走的太快就會減低分離效果。
  2.減壓法
  減壓法一般用于填充長柱子。這個方法采用真空泵抽氣,將填充核殼色譜柱的一端塞好硅烷化的玻璃棉后與真空泵的緩沖安全瓶相連接。為了防止抽氣時潮濕空氣進入而使固定相性能受影響,可以在填料池加入固定相后,在入氣口接氯化鈣和硅膠干燥塔,其他操作過程與加壓填充法相同。
  減壓柱能夠減少硅膠的使用量,感覺能夠節(jié)省一半甚至更多,但是由于大量的空氣通過硅膠會使溶劑揮發(fā),以及有些比較易分解的東西可能得不到,而且還必須同時使用水泵抽氣。
  3.手工填充法
  手工填充法一般只用于某些涂有沸點較低固定液的固定相的填充。通常采用邊裝邊敲打的辦法。每次加進柱內的填料約5cm。填充時應注意兩點:
 ?、俟潭ㄏ嘁畛渚鶆蚝途o密適度,柱內不留有死空間或者間隙;
  ②要避免填充過程中敲打振動過猛,造成固定相機械粉碎。
  壓力可以增加淋洗劑的流動速度,減少產(chǎn)品收集的時間,但是會降低柱子的塔板數(shù)。所以其他條件相同的時候,常壓柱是效率z高的,但是時間也長。

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