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國產(chǎn)液相色譜柱如何沖洗你知道么
國產(chǎn)液相色譜柱如何沖洗你知道么
我們首先預熱下國產(chǎn)液相色譜柱的相關參數(shù)：
1.表面積
顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和，以m2/gram表示。
高表面積對于多組份樣品的分離具有較強的保留能力，柱容量和分離度。表面積低的填料通常能迅速達到平衡狀態(tài)，對于梯度淋洗尤為重要。
2.孔徑
顆粒的孔或腔的平均尺寸，范圍60-10,000Å。
大孔的填料顆?？梢匝娱L溶質(zhì)大分子在填料表面滯留的時間，達到充分分離，改善峰形；樣品MW≤4000,選擇80Å的孔徑，樣品MW＞4000選擇300Å的孔徑。
3.碳覆蓋率
對液相色譜分離的影響，與基體物質(zhì)相連的鍵合相的量。高碳覆蓋率可以提高分辨率，分析時間長。低碳覆蓋率縮短運行時間。
4.封端/封尾
封端對色譜分離的影響，使用較短烷烴鏈鍵合游離硅羥基（二次鍵合）。封端就是減輕待測組份與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象，對于極性樣品，未封端與經(jīng)過封端處理的色譜柱在選擇性上有明顯差異。
5.粒徑
1.8um-3.5um便于快速分離，5um是行業(yè)標準，7um是制備柱。
如何沖洗液相色譜柱呢？
1.對于反相色譜柱的沖洗
用以下溶劑至少各25mL沖洗色譜柱(分析柱)：
不含緩沖鹽的流動相、100%甲醇、100%乙腈、75%乙腈+25%異丙醇、100%異丙醇、100%二氯甲烷、100%己烷。注意若使用己烷或二氯甲烷沖洗色譜柱，則在重新使用反相流動相以前，必須用異丙醇沖洗色譜柱。
2.對于正相色譜柱的沖洗
用以下溶劑至少各50mL沖洗色譜柱(分析柱)：50%甲醇+50%CH4CL3、100%乙酸乙酯。