內(nèi)毒素對細胞培養(yǎng)的影響

在細胞培養(yǎng)的精密世界中，一個微小的污染或者條件的非zuiyou嘴和都可能拖慢整個實驗的進程。今天，我們要聚焦的正是這個不容忽視的隱形威脅——內(nèi)毒素。

內(nèi)毒素：細胞培養(yǎng)的“隱形刺客"

內(nèi)毒素（如下圖），這個聽起來有些陌生的名詞，實際上在細胞培養(yǎng)中扮演著不容忽視的角色。內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細胞壁的一種成分，當細菌死亡或細胞壁破裂后，內(nèi)毒素會被釋放出來。這些微小的分子，雖然肉眼不可見，但卻能對細胞產(chǎn)生巨大的影響。具體有哪些影響呢，例如在細胞培養(yǎng)過程中，內(nèi)

毒素的污染可能導致細胞生長緩慢、細胞毒性增加，甚至影響瞬時轉(zhuǎn)染的效率。想象一下，您精心設計的實驗，因為內(nèi)毒素的污染而功虧一簣，是不是非常令人沮喪？對于追求精準與高效的現(xiàn)代生物研究而言，內(nèi)毒素控制成為了不可回避的問題。再進一步看看影響到什么程度：

 內(nèi)毒素對細胞培養(yǎng)的影響

1. 免疫和炎癥反應： 內(nèi)毒素可以激活細胞的免疫反應，導致炎癥因子的釋放，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）等。這些炎癥因子可以影響細胞的生理功能，導致細胞內(nèi)信號通路的紊亂，甚至可能引發(fā)細胞凋亡。

2. 細胞生長和代謝的影響： 高水平的內(nèi)毒素暴露可能影響細胞的生長和代謝。細胞在免疫激活狀態(tài)下可能會減緩生長，因為它們需要將資源用于炎癥反應。此外，內(nèi)毒素可能干擾細胞的代謝途徑，影響蛋白質(zhì)合成、DNA合成等。

3. 實驗結(jié)果的暗黑時刻：內(nèi)毒素的存在使實驗結(jié)果變得不穩(wěn)定，可靠性大打折扣，需要多次重復結(jié)果以保證其數(shù)據(jù)的有效性。

4. 影響細胞因子和蛋白質(zhì)的表達：內(nèi)毒素的存在可能導致細胞產(chǎn)生炎癥相關(guān)的細胞因子和蛋白質(zhì)的表達增加。這可能對特定的研究課題產(chǎn)生影響，如細胞信號通路、蛋白質(zhì)相互作用等的研究。

5. 內(nèi)毒素對瞬時轉(zhuǎn)染的影響：內(nèi)毒素的存在會極大程度地影響轉(zhuǎn)染效率，尤其是瞬時轉(zhuǎn)染。由于內(nèi)毒素的兩親性和負電荷性，性質(zhì)類似于DNA，因此在質(zhì)粒純化中會伴隨質(zhì)粒一同被純化出來。這些內(nèi)毒素在轉(zhuǎn)染過程中可能與轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒形成不穩(wěn)定的復合物，從而降低質(zhì)粒與細胞的結(jié)合效率和轉(zhuǎn)染效率。內(nèi)毒素含量越低，轉(zhuǎn)染效率也越高。特別是在使用陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑時，內(nèi)毒素的影響更為顯著，所以確保細胞培養(yǎng)液中低類毒素含量是非常重要的。

使用BioProE的DPBS和DMEM高糖培養(yǎng)基無需擔心以上問題。