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氣態(tài)液氮罐能儲存干細(xì)胞嗎?

閱讀:2549        發(fā)布時間:2020/2/17
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   氣態(tài)液氮罐廣泛用于細(xì)胞凍配上,如牛精液冷凍的冷源廣泛應(yīng)用液氮。顆粒精液在經(jīng)液氮冷卻的氟板(聚四氟乙烯)、銅紗網(wǎng)、鋁板上滴凍。要使承接精液的表面與液氮面連結(jié)一定的間隔(1-2厘米)。在滴凍的歷程中,要維持在-80~-120℃的溫度。滴凍前將顛末均衡的精液充實混勻,并查抄精子的活率。滴要敏捷,顆粒要勻稱,每毫升顛末稀釋的精液滴10粒左右為宜。滴凍竣事后,要停頓2-3分鐘,待全部顆粒已凍結(jié)立刻投入液氮。經(jīng)抽樣查抄(一樣通常隨機抽取2粒),解凍活率在0.3以上者,即可裝于紗布袋中,經(jīng)標(biāo)志后在液氮中生存。每滴凍完一頭公牛的精液后,必須調(diào)換氟板等用具。
  現(xiàn)在細(xì)管的容量分0.25毫升和0.5毫升兩種,氣態(tài)液氮罐由無毒塑料(聚氯乙烯)制成。管的一端填有棉塞和聚乙烯粉末,粉末遇水即固化主動封口,輸精時又成為推送精液的活塞;另一端在注入精液后,可以聚乙烯粉或鋼珠(或塑料珠)封口,要細(xì)致在封口處與精液間留有10-13毫米的空間,防備冷凍歷程中因膨脹引起細(xì)管爆裂。
  長期以來,科學(xué)家們都認(rèn)為氣態(tài)液氮罐儲存的干細(xì)胞(NSCs)是一種具有無限自我更新能力的均質(zhì)細(xì)胞。在進入成體NSC研究領(lǐng)域的時候,一些研究證明NSCs實際上是異質(zhì)的,不均勻的,它們的自我更新能力,休眠期和命運均不同,這說明NSC亞群在整體NSC干細(xì)胞貢獻(xiàn)不同,必須協(xié)調(diào)相互的作用。而亞群之間的不平衡也許就會損傷NSC,導(dǎo)致NSC功能衰退。
  對氣態(tài)液氮罐儲存干細(xì)胞周圍微環(huán)境分子機制作分析,實驗室研究發(fā)現(xiàn)休眠期成體NSCs受控于外在微環(huán)境信號來引導(dǎo)它們的行為,而激活的NSCs和祖細(xì)胞則是依賴于內(nèi)在轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。通過了解不同微環(huán)境因素對特定NSCs亞群的調(diào)控深入解析NSCs。

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