目录:合肥恩派尔贸易有限公司>>Abnbio感受态细胞>>克隆感受态细胞 非电击>> HB101Chemically Competent Cell克隆感受态细胞
供货周期 | 现货 | 规格 | 50支100ul |
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货号 | ABG016-50 | 应用领域 | 化工,生物产业,制药/生物制药 |
主要用途 | 细胞培养 |
HB101 Chemically Competent Cell
基因型:
F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-) recA13 leuB6 ara-14 proA2lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20 (strR) glnV44λ-
简要说明:
HB101菌株是 E. Coli K12菌株和 E. Coli B 菌株的杂合产物(同时也是Stbl3的原始菌株)。recA13突变可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低错误重组的概率;但不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液。hsdS20背景使HB101缺失内切酶系统,增强了外源DNA的稳定性和提取质量;此菌株具有LIAN霉素抗性;不存在lacIqZΔM15,不可用于蓝、白斑筛选。 High5TM系列HB101感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率>5×108cfu/μg。
操作说明:
1.HB101感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,待菌体处于冰水混合状态时,加入目的DNA(质?;蛄硬锊⒂檬执駿P管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB无菌培养基,混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项:
1.感受态细胞处于冰水混合状态时立即插入冰上。
2.混入质?;蛄硬锸庇η崛岵僮?。
3.转化高浓度的质?;蚋咝实牧硬锟上嘤跎僮钪沼糜谕堪宓木?。
4.操作过程中勿将感受态暴露于氧化性环境中,例如超净台应将臭氧排净后再使用。