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流式细胞仪该如何选择呢?

阅读:66          发布时间:2025-6-12
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流式细胞仪该如何选择呢?

一、明确核心应用场景

1. 检测目的

  • 细胞分析(Analytical):适用于细胞表型鉴定、凋亡检测、细胞周期分析等,选择分析型流式细胞仪即可(如 BD FACSCalibur、贝克曼 CytoFLEX S)。

  • 细胞分?。⊿orting):需将特定细胞群体分离出来(如单克隆筛选、稀有细胞富集),必须选择分选型流式细胞仪(如 BD FACSAria、Cytek AURORA sorter),但价格更高(通常为分析型的 2-5 倍),且需符合生物安全等级(如分选感染性样本需配备生物安全柜)。

2. 样本类型

  • 常规细胞样本:血液、细胞培养液、组织消化液等,普通流式细胞仪即可处理;

  • 特殊样本

    • 微量样本(如穿刺液、外泌体):需选择支持低流速进样或微量上样??榈囊瞧鳎ㄈ?Cytek Northern Lights);

    • 高通量样本(如临床批量检测):需配备自动进样器(如 BD FACSymphony 的 96 孔板进样模块);

    • 固定化样本 / 荧光微球:需确认仪器激光功率和检测器灵敏度是否匹配。

二、关键技术参数筛选

1. 激光器配置与荧光参数数量

  • 激光器数量:决定可检测的荧光染料种类,常见配置:

    • 入门级:1-2 激光(488nm 蓝光 + 633nm 红光,适用于 3-5 色检测,如 BD Accuri C6);

    • 科研级:3-5 激光(新增 405nm 紫光、488nm 蓝光、561nm 绿光等,支持 6-15 色检测,如贝克曼 CytoFLEX LX);


  • 荧光通道(Detector):需根据实验中使用的荧光染料(如 FITC、PE、APC、Alexa Fluor 系列等)匹配其激发 / 发射波长,例如:

    • 488nm 激光可激发 FITC(发射 525nm)、PE(575nm)、PerCP(670nm)等;

    • 633nm 激光可激发 APC(660nm)、APC-Cy7(780nm)等。

2. 检测灵敏度与分辨率

  • 灵敏度:以荧光微球的最小检测浓度衡量(如可检测<50MESF 的荧光强度),灵敏度越高,越适合弱荧光信号(如细胞内细胞因子、稀有抗原)检测;

  • 分辨率:主要看前向散射光(FSC,反映细胞大?。┖筒嘞蛏⑸涔猓⊿SC,反映细胞颗粒度)的区分能力,优质仪器可清晰分辨血小板、红细胞、白细胞等微小差异。

3. 检测速度与分选效率

  • 分析速度:通常以每秒检测细胞数(Events/s)为指标,常规仪器可达 10,000-50,000 Events/s,高速型(如 BD FACSymphony)可达 100,000+ Events/s;

  • 分选速度:分选型仪器需关注每秒分选细胞数(如 1,000-10,000 Cells/s)及纯度(>99%),同时需考虑液滴偏转技术(如充电脉冲式、声学聚焦式)对细胞活性的影响。

三、硬件与功能扩展性

1. 进样系统与样本容量

  • 手动进样 vs 自动进样:手动进样适合少量样本(<20 管 / 天),自动进样器(如 96 孔板、384 孔板模块)适合高通量场景,但需额外付费(约占仪器总价 10%-20%);

  • 样本量兼容性:如支持微量上样(10-50μL)或大体积上样(5-10mL),避免样本浪费。

2. 升级空间

  • 激光器升级:部分仪器支持后期添加激光器(如初始配置 3 激光,可升级至 5 激光),但需确认厂商是否提供改装服务;

  • 软件??槔┱?/span>:如是否支持质谱流式(CyTOF)、光谱流式(Spectral Flow Cytometry)等高级功能(需硬件 + 软件同时支持)。

四、品牌与售后服务评估

1. 主流品牌特点

品牌优势领域代表型号适合场景
BD临床检测、高速分选FACSAria、FACSymphony医院、大型科研机构
贝克曼(Beckman)多色分析、性价比高CytoFLEX 系列高校、科研院所
Cytek光谱流式(全光谱检测)AURORA、Northern Lights复杂多参数分析、免疫学
索尼(Sony)微流控分选、细胞活性保护SH800、iCELLigence干细胞研究、稀有细胞分选
国产(如迈瑞、博奥晶典)性价比高、本土服务响应快MFI 系列、Aries教学实验室、基础科研

2. 售后与技术支持

  • 装机培训:是否提供现场操作培训(至少 3 天)及进阶课程(如多色实验设计);

  • 响应时间:厂商工程师上门维修的承诺时效(如 48 小时内),是否有本地服务中心;

  • 软件更新:是否免费提供软件升级(如新增数据分析??椋?,避免版本落后影响功能。

六、合规与特殊需求适配

1. 临床 / 法规要求

  • 若用于临床检测(如白血病免疫分型),需选择具备 NMPA(中国)或 FDA(美国)认证的机型(如 BD FACSCanto II、贝克曼 CytoFLEX S Clinical);

  • 生物安全等级:分选感染性样本(如 HIV、新冠病毒相关细胞)需选择具备封闭分选系统(如 BD FACSAria III BSL3 ??椋┑囊瞧?。

2. 数据管理与合规性

  • 软件是否支持电子数据记录(符合 GLP/GMP 要求)、数据加密及审计追踪功能;

  • 是否兼容实验室信息管理系统(LIMS),便于高通量数据整合。

七、选型流程建议

  1. 列出实验需求清单:如检测色数、样本类型、分选需求、预算范围;

  2. 联系厂商预约 Demo:携带实际样本测试仪器性能(如荧光分辨率、分选纯度);

  3. 对比用户评价:参考同行使用反?。ㄈ?“仪器稳定性"“软件易用性");

  4. 谈判附加服务:争取免费延保、耗材折扣、培训名额等优惠

    流式细胞仪的应用为什么那么广泛?




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