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PJ許衛(wèi)鋒:NMT發(fā)現(xiàn)G蛋白γ亞基、14-3-3均可促低P下水稻泌H+

閱讀:833        發(fā)布時(shí)間:2021-8-26

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感謝本文一作,福建農(nóng)林大學(xué)許飛云博士校稿



基本信息

主題:NMT發(fā)現(xiàn)G蛋白γ亞基、14-3-3均可促低P下水稻泌H+為兩者互作調(diào)控質(zhì)子泵從而促根伸長(zhǎng)及吸P提供證據(jù)

期刊:The Plant Journal

影響因子:6.141

研究使用平臺(tái)NMT植物營(yíng)養(yǎng)創(chuàng)新平臺(tái)

標(biāo)題:Rice G protein γ subunit qPE9-1 modulates root elongation for phosphorus uptake by involving 14-3-3 protein OsGF14b and plasma membrane H+-ATPase

者:福建農(nóng)林大學(xué)許衛(wèi)鋒、許飛云、王珂


檢測(cè)離子/分子指標(biāo)

H+


檢測(cè)樣品

水稻根




中文摘要


異源三聚體G蛋白參與植物生長(zhǎng)發(fā)育,而水稻G蛋白γ亞基qPE9-1響應(yīng)低磷(LP)的作用機(jī)制尚不清楚。在LP條件下,qPE9-1基因在水稻根系中的表達(dá)明顯受到誘導(dǎo)。攜帶qPE9-1等位基因的水稻品種比攜帶qpe9-1等位基因的水稻品種(qPE9-1等位基因的突變體)對(duì)LP表現(xiàn)出更高的主根響應(yīng)。在LP條件下,具有qPE9-1等位基因的轉(zhuǎn)基因水稻比具有qpe9-1等位基因的轉(zhuǎn)基因水稻具有更大的主根長(zhǎng)度和P濃度。質(zhì)膜(PM)H+-ATPase對(duì)qPE9-1介導(dǎo)的LP響應(yīng)非常重要。此外,一種14-3-3蛋白OsGF14b,作為激活PM H+-ATPase促進(jìn)根系伸長(zhǎng)的關(guān)鍵成分,也參與了qPE9-1的介導(dǎo)。另外,OsGF14b在WYJ8(攜帶qpe9-1等位基因)中過(guò)表達(dá)部分增加了LP條件下的主根長(zhǎng)度。使用R18肽(14-3-3 蛋白抑制劑),qPE9-1通過(guò)14-3-3蛋白參與LP條件下主根的伸長(zhǎng)和H+外排。在LP條件下,干燥土壤中qPE9-1株系的根鞘(rhizosheath)重量、全P含量和根鞘土壤Olsen-P濃度均高于qpe9-1株系。這些結(jié)果表明,水稻中的G蛋白γ亞基qPE9-1通過(guò)14-3-3蛋白OsGF14b和PM H+-ATPase來(lái)調(diào)節(jié)根系伸長(zhǎng)以吸收磷。



離子/分子流實(shí)驗(yàn)處理


1. 300 μM P(對(duì)照)處理7 d
2. 300 μM P +30 μM VAN(釩酸鹽,一種PM H+-ATPase抑制劑)處理7 d
3. 300 μM P +2 μM FC(殼梭孢菌素,一種PM H+-ATPase刺激劑)處理7 d
4. 2 μM P(LP)處理7 d
5. 2 μM P+30 μM VAN處理7 d
6. 2 μM P+2 μM FC處理7 d
7. 300 μM P +10μg/mL R18處理7 d
8. 2 μM P+10 μg/mL R18處理7 d



離子/分子流實(shí)驗(yàn)結(jié)果

使用VAN和FC研究qPE9-1對(duì)PM H+-ATPase的影響。LP條件下,qPE9-1回補(bǔ)系和ZH11的H+外排速率增加;然而,在WYJ8和RNAi株系的H+外排速率沒(méi)有差異。施加FC導(dǎo)致qPE9-1回補(bǔ)系和WYJ8對(duì)H+外排速率的響應(yīng)相似。在有VAN的LP條件下,qPE9-1回補(bǔ)系與WYJ8或ZH11與RNAi株系的H+外排速率沒(méi)有顯著差異(圖1)。

圖1. 水稻在300 μM P、300 μM P +30 μM VAN、2 μM P、2 μM P+30 μM VAN、2 μM P+2 μM FC處理7 d后的H+外排速率正值代表H+外排。

為進(jìn)一步了解qPE9-1介導(dǎo)的H+外排增加是否與OsGF14b相關(guān),使用了14-3-3蛋白抑制劑R18肽(圖2)。在LP條件下,qPE9-1回補(bǔ)系的H+外排速率比對(duì)照條件下高。然而,當(dāng)添加R18時(shí),與正常生長(zhǎng)(對(duì)照條件)相比,LP 條件下 WYJ8 的H+外排速率沒(méi)有任何顯著差異。在具有R18肽的LP下,qPE9-1回補(bǔ)系和WYJ8之間的H+外排速率沒(méi)有顯著差異(圖 2C)。還使用了qPE9-1表達(dá)減少的株系。類似地,在具有R18肽的 LP 條件下,ZH11和RNAi株系之間的H+外排速率沒(méi)有顯著差異(圖 2D)

圖2. 水稻在300 μM P 、300 μM P +10 μg/mL R18肽、2 μM P 、2 μM P+10 μg/mL R18肽處理7 d后的H+外排速率。正值代表H+外排。





其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果


  • 攜帶qPE9-1等位基因的水稻品種在LP下表現(xiàn)出較高的qPE9-1表達(dá)水平和較大的主根長(zhǎng)度。

  • 在WYJ8中回補(bǔ)qPE9-1會(huì)增加LP條件下的主根長(zhǎng)度和P濃度

  • 在LP條件下,qPE9-1表達(dá)減少會(huì)降低主根長(zhǎng)度和P濃度。

  • qPE9-1與OsGF14b(一種14-3-3蛋白,作為激活PM H+-ATPase促進(jìn)根伸長(zhǎng)的關(guān)鍵成分)相互作用并影響OsGF14b在水稻中的表達(dá)。

  • qPE9-1是LP條件下干燥土壤中根鞘形成和P積累所必需的。



結(jié)論

綜上所述,水稻G蛋白γ亞基qPE9-1與14-3-3蛋白OsGF14b相互作用可能是通過(guò)提高低磷條件下OsGF14b基因在水稻根系中的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。其次,OsGF14b增加水稻中PM H+-ATPase的活性,促進(jìn)H+外排,這對(duì)根系伸長(zhǎng)和磷吸收非常重要。這些結(jié)果增加了對(duì)水稻響應(yīng)低磷的理解



測(cè)試液


0.1 mM KCl, 0.1 mM CaCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 6.0



儀器采購(gòu)信息


據(jù)中關(guān)村NMT產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟了解,福建地區(qū)的福建農(nóng)林大學(xué)于2015采購(gòu)了美國(guó)揚(yáng)格公司的非損傷微測(cè)系統(tǒng)。


關(guān)鍵G蛋白γ亞基qPE9-1;H+外排;14-3-3蛋白OsGF14b;缺磷;根伸長(zhǎng);水稻



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