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旭月非損傷微測技術(shù)(NMT)與激光共聚焦技術(shù)

閱讀:545        發(fā)布時(shí)間:2017-5-18

 NMT和激光共聚焦技術(shù)的比較

 

什么是激光共聚焦

激光掃描共聚焦熒光顯微鏡laser scanning confocal microscopy, LSCM是一種利用計(jì)算機(jī)、激光和圖像處理技術(shù)獲得生物樣品三維數(shù)據(jù)、目前較為*分子細(xì)胞生物學(xué)的分析儀器。 

                  

主要用于觀察活細(xì)胞結(jié)構(gòu)及特定分子、離子的生物學(xué)變化,定量分析,以及實(shí)時(shí)定量測定等。其不僅可以得到非常清晰的熒光圖像,進(jìn)行多重?zé)晒鈽?biāo)記的定位和定量分析,還具有圖像三維重建、熒光共振能量轉(zhuǎn)移譜測定,甚至膜電位測定等功能,成為生命科學(xué)研究的重要技術(shù)手段。

 

激光共聚焦的局限

隨著激光共聚焦技術(shù)應(yīng)用范圍的擴(kuò)大,其在研究中的局限性也逐漸突顯。

 

激光共聚焦技術(shù)主要采集的是生物樣品內(nèi)部的離子分子信息,這些離子分子信息的改變既可能源于樣品內(nèi)部離子/分子源的變化,也可能源于樣品內(nèi)外的離子/分子交換。這兩種離子/分子變化過程是由*不同的生命機(jī)制引發(fā)的。

 

這要求研究者必須通過其它實(shí)驗(yàn)結(jié)果,才能得出相對(duì)準(zhǔn)確的結(jié)論。若單純用激光共聚焦數(shù)據(jù)作為檢測或診斷標(biāo)準(zhǔn),往往面臨較大的假陽性風(fēng)險(xiǎn)。

 

NMT對(duì)比激光共聚焦

 

共同點(diǎn)

  • 實(shí)時(shí)

  • 動(dòng)態(tài)

  • 數(shù)據(jù)可視化

  • 測定游離的離子

     

差異

激光共聚焦技術(shù)非損傷微測技術(shù)
使用染料和激光光源使用電極或者傳感器
需要標(biāo)記無需標(biāo)記
熒光易發(fā)生淬滅電極或者傳感器穩(wěn)定
測量時(shí)間短測量時(shí)間可短,可長
半活體(有損傷)近似活體或者*活體(測定無損傷)
檢測內(nèi)部的離子濃度變化檢測跨膜的離子流速以及外部的離子濃度
測定種類較少,依賴于染料測定種類多,可測Na+,K+NO3-,O2
測量材料不能太大,以細(xì)胞為主測量材料不限,從細(xì)胞到整體都可以測量
只能同時(shí)測定一種離子可以同時(shí)測定兩種離子

 

NMT可測樣品種類繁多

NMT可以同時(shí)測定兩種離子

 

結(jié)合

將激光共聚焦技術(shù)與非損傷微測技術(shù)(NMT)的結(jié)合,可以克服單純用激光共聚焦數(shù)據(jù)作為檢測或診斷標(biāo)準(zhǔn)面臨較大的假陽性風(fēng)險(xiǎn),實(shí)現(xiàn)全面獲得被測樣品內(nèi)外的離子/分子流動(dòng)信息。實(shí)現(xiàn)內(nèi)外兼測。

 

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