人肾小球内皮原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

人肾小球内皮细胞分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛，被鲍氏囊所包裹，是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管，汇流入静脉，而是流入出球小动脉。在肾小球内，微血管受到高压，而加速了超滤作用（hyperfiltration）的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后，形成滤液，渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体，肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形，单层贴壁生长；细胞质丰富，细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球毛细血管壁腔侧，与血流直接接触，是肾小球滤过膜的第一道屏障，可粘附细菌和白细胞，修复基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，体外培养的肾小球内皮细胞在免疫学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。

方法简介：

公司实验室分离的人肾小球内皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化，结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人肾小球内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　?、?悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

CL187/CCL187细胞，人大肠癌细胞 人黑色素瘤细胞,M14细胞 人多发性骨髓瘤细胞;RPMI-8226 [RPMI8826]  LRRTM4 Others Human 人 LRRTM4 人细胞裂解液   293T, SV40转化的人胚肾上皮细胞系 小鼠原B细胞 小鼠原代室管膜细胞 人原代脂肪血管基质细胞

GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha 0.5mgGSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)

ING5 Protein Human 重组人 ING5 蛋白 (GST 标签)

IL18R1重组大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 标签) Protein

EREG Protein Mouse 重组小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 标签)

CAMKV重组人 CAMKV 蛋白 (His & GST 标签) Protein

人真胰岛素(TI)ELISA 试剂盒

Human tumor necrosis factor alpha conveing enzyme (TACE) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)试剂盒

Humanproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGH试剂盒人免疫反应性生长激素(irGH)试剂盒规格：96T/48T

组织基质金属蛋白酶(MMP-14)活性荧光定量试剂盒20次(10样本)

HumanleukocyteaigenA，HLA-AELISAKit人类白细胞抗原A(HLA-A)试剂盒规格：96T/48T

人脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人骨胶原交联(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人肾小球内皮原代细胞豚鼠白介素12(IL-12/P70)试剂盒 ，英文名： IL-12/P70 ELISA Kit

Human nonmethylated oligonucleotide (NON) ELISA Kit 人非甲基化寡核苷酸(NON)试剂盒

RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 兔子表皮生长因子(EGF)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(HumanBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M

细菌印度墨负性染色试剂盒50次

RabbitE-SelectinELISAKit兔子E选择素(E-Selectin/CD62E)试剂盒规格：96T/48T

HA重组甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PACAP(1-38 Peptide 0.5mgPACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸环化酶激活肽 1-38(全蛋白)

CD97重组人 CD97 蛋白 (Fc 标签) Protein

ITGA5 & ITGB6 Protein Human 重组人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白

ACVR2B Protein Human 重组人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 标签)

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。