详细介绍
商品介绍:
用途: 退行性染色液,适用于石蜡切片染色 注意事项: Gill No.3苏木素染色液又称GillⅢ液,为正常浓度的2倍,石蜡切片染色大于15分钟。属于半氧化苏木素,比Harris苏木素稳定,染色需盐酸乙醇分化,其缺点是:黏附的明胶甚至玻片也会染色。 储存条件:室温,12个月 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
100ml|500ml | 1~3天 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
土贝母苷乙英文名称: Arbutin组织相关抗原HLA-B15抗体包装25g
土鳖虫(地鳖)(标准品)英文名称: Sanguinarine chloride蛋腺苷转移抗体包装5g
土鳖虫(冀地鳖)(标准品)英文名称: Secoisolariciresinol Diglucoside磷化丝裂原活化的蛋白激p38β抗体包装100ml
土大黄(标准品)英文名称: Aminomalonic acid 磷化自噬微管相关蛋白轻链3抗体包装25ml
土大黄苷(标准品)英文名称: AZD-4547粘蛋白-5B抗体包装5g
土茯苓(标准品)英文名称: Zineb粘蛋白-3抗体包装1g
土槿皮(标准品)英文名称: Wilforine鸡马立克氏病火鸡疱疹病抗体包装1g
土荆芥(标准品)英文名称: Neogambogic acid多药耐药蛋白/P-糖蛋白抗体(C端)包装5g
土荆皮(金钱松)(标准品)英文名称: Diosgenin glucoside硝唑抗体包装25g
土荆皮(标准品)英文名称: N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine黑色瘤相关抗原4抗体包装5g
土荆皮乙(标准品)英文名称: Bergenin钙结合蛋白39抗体包装10g
土垄大白蚁巢(标准品)英文名称: Bergenin线粒体抗病信号MAVS蛋白抗体包装50g
土木香(标准品)英文名称: Palmatine hydrochloride巨噬集落激因子受体抗体包装1g
土木香内酯(标准品)英文名称: Palmatine hydrochloride肿瘤转移相关蛋白1抗体包装25g
土牛膝(标准品)英文名称: Phellodendrine chloride粘蛋白4抗体包装5g
纤维堆囊菌Sorangium│cellulosum 质量规格:HPLC>98.0%,标准品卷曲螺旋, 肌球蛋白样BCL2 结合蛋白/自噬基因Beclin 1试剂盒常山乙;Febrifugine
粘帚霉Gliocladium│sp. 质量规格:HPLC>85%,二BR卷曲蛋白8试剂盒车叶草苷;Asperuloside
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格:HPLC>98.0%,标准品聚集蛋白试剂盒草;Oxalic acid
Gill苏木素染色液(Gill No.3)棱盖多孔 4--2,8-双(三氟甲基)喹啉绿色荧光蛋白Elisa
梨黑斑链格孢 3--4-甲酸美金刚Elisa
樟疫霉 2',4'-二甲氧基苯乙酮锰超氧化物歧化Elisa
贝伦格勒座腔梨专化型 N-((S)乙氧羰基-1-丁基)-(S)-氨酸糜蛋白Elisa
酿酒酵母 4-(4-氨基苯基)啉-3-酮球蛋白AElisa
Phoma medicaginis var. medicaginis 基环己基环己球蛋白DElisa
松乳菇 (S)-(-)-1-(3-甲氧苯基)乙球蛋白EElisa
黄盖蜜环 (S)-3-二甲基氨基-3-苯球蛋白GElisa
粉状毕赤氏酵母 O-叔丁基-L-苏氨酸球蛋白G1Elisa
黑络丸 8-氨基萘磺酸球蛋白G2Elisa
酿酒酵母 3-溴邻苯二甲酸酐球蛋白G2aElisa
枯草芽孢杆 5-溴-2-三氟球蛋白MElisa
平脐蠕孢 N-磺酸丁基吡啶硫酸氢盐缪勒管抑制物质;抗缪勒管Elisa
根瘤 3-吡唑-4-甲酸乙酯膜联蛋白-A2Elisa
枯草芽孢杆 肉桂,顺式+反式末端补体复合物Elisa