详细介绍
产品属性:
中文名称:细胞骨架蓝色荧光探针
英文名称:
产品规格:200μL
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
商品介绍:
本染料是F-肌动蛋白的高亲和力探针,由蘑菇毒素制成,与蓝色荧光染料偶联。以纳米摩尔浓度使用时,鬼笔毒素是方便的探针,可用于对固定和打孔的组织切片、细胞培养物或无细胞实验体系中的F-肌动蛋白进行标记、鉴别和定量。 Ex/Em:350nm/450nm,比抗体染色更*。适合于固定和通透的样本。 荧光标记的鬼笔环肽与肌动蛋白对于不同的物种,包括植物和动物具有几乎相同的高结合属性。鬼笔环肽结合具有高选择性,而F-肌动蛋白红色荧光。呈现出很少的非特异性染色。本产品可以用于荧光显微镜、微孔板、比色皿。 浓度:200U/mL储存:-20℃,避光,有效期6个月。 |
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
白头翁皂苷E英文名称: Nickel (II) fluoride tetrahydrate上皮膜蛋白3抗体包装5g
白头翁皂苷E-1英文名称: Silicon (IV) oxide膜蛋白EVC2抗体包装1g
白头翁皂苷E-2英文名称: Strontium fluoride哺乳动物室管膜相关蛋白1抗体包装5g
白头翁皂苷E-3英文名称: Syringaldehyde内皮粘附分子抗体包装10g
白土苓(短柱肖菝契)(标准品)英文名称: Tetrazolium violet上皮有丝分裂蛋白抗体包装50g
白土苓(华南肖菝葜)(标准品)英文名称: 2-MethylindoleEmerin蛋白抗体包装25g
白薇(标准品)英文名称: Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate外信号调节激5抗体包装5g
白鲜碱(标准品)英文名称: AMP buffer concentrate磷/磷二酯家族成员5抗体包装1g
白鲜皮(标准品)英文名称: Benzimidazole早期生长反应蛋白2抗体包装25g
白杨(标准品)英文名称: Carboxypeptidase B磷化雌激受体β抗体包装5g
白杨-7-O-龙胆二糖苷英文名称: Cobalt (II) carbonate, hydrate乙激β抗体包装1g
白英(标准品)英文名称: dTDP微管相关末端结合蛋白2抗体包装5g
白芷(标准品)英文名称: Galactose oxidase减数分裂内切EME1抗体包装1g
百部(对叶百部)(标准品)英文名称: Iron (II) oxalate, dihydrate延伸突触蛋白2抗体包装25g
百部(直立百部)(标准品)英文名称: Lead (II) chloride延伸突触蛋白1抗体包装5g
40044=ATCC23908=CBS804.68=IFO12862=ISP资源名称: 脆弱链霉菌 质量规格:>98%,BR通道蛋白4抗体试剂盒人参皂苷Ginsenoside
出芽短梗霉Aureobasidium│pullulans 质量规格:HPLC≥98%,标准品通道蛋白3试剂盒人参皂苷RD;Ginsenoside R
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:>98%,BR痘带状疱疹病IgM试剂盒人参皂苷RC;Ginsenoside R
细胞骨架蓝色荧光探针弗雷德里克斯堡假单胞 3-氯-2-吡甲酸甲酯蛋白聚糖Elisa
小奥德蘑 1,3-双(2-异基-2-基)苯碱性成纤维生长因子抗体Elisa
三骨菇 反式-4-(叔丁氧羰基氨基)环己基羧酸甘油二酯Elisa
桔青霉 4-氮杂-3-甲过氧化物体Elisa
喜寒犁头霉 2-甲基丁酸-3-甲基丁酯核内蛋白Elisa
胡椒枯萎病 富马酸单甲酯结核杆抗原Elisa
短小芽孢杆 DL-二硫苏糖铜锌过氧化物岐化Elisa
笔状地霉 2-甲基吗啉趋化因子C-C-基元受体6Elisa
大肠埃希 亮氨酸叔丁酯盐酸盐磷酸化肝生长因子受体Elisa
链霉 咪唑并[1,2-a]吡啶分泌型碱性磷酸Elisa
大肠埃希氏 N-甲基-4-溴苯甲酰Smads2Elisa
黄芪叶杆 3-溴-4-氟Smads7Elisa
红缘拟层孔 苯并恶唑糖蛋白AElisa
运动张树政氏 乳糖酸钠白蛋白抗体Elisa
奇异变形杆49005 盐酸左电压依赖性阴离子通道蛋白1Elisa
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)