详细介绍
产品属性:
中文名称:AO荧光染色试剂盒
英文名称:
产品规格:100T
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
商品介绍:
用途: 流式细胞术检测细胞DNA含量,通过染色定量分析DNA,亦可通过荧光显微镜观察形态变化。 注意事项: 一步法,主要由AO储存液和AO稀释液组成,含破膜剂,简便易行。 储存条件:4℃,避光,6个月 |
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
去氢土莫英文名称: DBD-ED [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(2-aminoethylamino)-2,1,3-benzoxadiazole] 鸟苷环化激活蛋白2抗体包装100ml
去亚基小檗碱(标准品)英文名称: AABD-SH (=4-Acetamido-7-mercapto-2,1,3-benzoxadiazole) 鸟苷环化激活蛋白3抗体包装25g
去氧紫草(标准品)英文名称: 9-(Bromomethyl)acridine 基合成抗体包装5g
去乙酰车叶草酯(标准品)英文名称: DBD-COCl [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-chloroformylmethyl-N-methylamino)-2,1,3-benzoxadiazole]高尔基体卷曲螺旋蛋白1抗体包装1g
全蝎(标准品)英文名称: NBD-COCl [=4-(N-Chloroformylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole] 高尔基体卷曲螺旋蛋白2抗体包装250mg
全叶青兰(标准品)英文名称: o-Phthalaldehyde 戊二酰脱氢抗体包装5g
拳参(标准品)英文名称: Dansyl HydrazineGTP环反馈调节蛋白抗体包装5mg
染料木苷(标准品)英文名称: DBD-H [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-hydrazino-2,1,3-benzoxadiazole] 绒毛膜特异性转录因子GCM2抗体包装25g
染料木/金雀异黄(标准品)英文名称: NBD-H (=4-Hydrazino-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole Hydrazine) 广泛控制基合成1样蛋白1抗体包装5g
人参(标准品)英文名称: 1,3-Cyclohexanedioneβ1-6 N-乙酰基葡萄糖转移2抗体包装250mg
人参二(标准品)英文名称: ABD-F [=4-(Aminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]磷化G蛋白激活内向通道1抗体包装100g
人参茎叶(标准品)英文名称: Ferroceneacetic AcidG蛋白偶联受体激相互作用蛋白2抗体包装25g
人参芦头(标准品)英文名称: (Hydrazinocarbonyl)ferrocene间隙连接蛋白10抗体包装500g
人参三(标准品)英文名称: Dimethyl Sulfoxide间隙连结蛋白46/白内障相关蛋白抗体包装1g
人参皂苷CK(标准品)英文名称: 1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene间隙连结蛋白50/白内障相关蛋白抗体包装25g
镰孢Fusarium│sp. 质量规格:HPLC>98%,标准品尿微量白蛋白试剂盒罗汉果苷III;Mogroside II
棒形小克银汉霉Cunninghamella│clavata 质量规格:>98%,USP grade尿相关蛋白C试剂盒律草;Humulone
ATCC44166=DSM2191资源名称: 米根霉 质量规格:HPLC≥98%,标准品尿皮龙胆;2,5-Dihydroxyben
AO荧光染色试剂盒大肠埃希 2-氟-6-甲氧基苯甲U3小核糖核蛋白IMP3Elisa
中慢生华癸根瘤 巴豆酸异丁酯畸胎瘤源性生长因子Elisa
黄杆 巴豆酸异丁酯封闭蛋白5Elisa
黑木耳 4-乙基苯超敏心肌肌钙蛋白ⅠElisa
大孢枝孢 3-氯-2-氟苯甲谷氨酰合成Elisa
大羽须瑚 2-甲硫基-4-氨基嘧啶-5-甲幽门螺杆尿抗体Elisa
枯草芽孢杆 4-甲基-3-幽门螺杆相关基因蛋白A抗体Elisa
大肠埃希 磷酸甜菜碱心营养-1Elisa
冬虫夏草 Fluvastatin Sodium组织蛋白G抗体Elisa
芽孢杆属 5-溴-6-氯-3--β-D-吡喃葡萄糖苷θ-防御Elisa
褐囊蜜环 甲氧基酮聚乙二主链的IgG抗体Elisa
鲜绿青霉 2'-脱氧-5'-O-DMT-肌苷单磷酸腺苷激活蛋白Elisa
黄褐色牛杆 1,4-二乙炔基苯还原黄腺嘌呤二核苷酸Elisa
大豆慢生根瘤 1-丁基-1-甲基吡咯烷溴化物基质金属蛋白19Elisa
Pseudoclavibacter caeni Srinivasan (+)-4,5-双[羟基(二苯基)甲基]-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环基质金属蛋白20Elisa
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)