详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
AN3199 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg | 1~3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍:
AN3199是一种PDE4抑制剂,IC50为94.5nM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:1187187-10-5 纯度:98.0% 分子量:327.14 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
大肠埃希菌DDX58抗体Human TCF4(Transcription factor 4) ELISA Kit人补体因子H(CFH)免疫试剂盒
(镰刀菌)DG4DDX4抗体Human PLD1(Phospholipase D1) ELISA Kit人补体因子B前体(pre-CFB)免疫试剂盒
虫草属鸭瘟病DPV抗体Human YRDC (YrdC domain-containing protein, mitochondrial) ELISA KIT人补体片断5b(C5b)免疫试剂盒
长双歧杆菌交联纤维蛋白二聚体抗体Human ITIH5L(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H5-like protein) ELISA Kit人补体片断5a(C5a)免疫试剂盒
干草鞘单胞菌脑发育调节蛋白抗体Human S100A4(Protein S100-A4) ELISA Kit人补体片断4b(C4b)免疫试剂盒
猪丹丝菌DNA断裂因子抗体(蛋白激活脱氧核糖核)Human GCLC(Glutamate-cysteine ligase catalytic subunit) ELISA Kit人补体片断3b(C3b)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌脱氧核糖核γ抗体Human MSRA(Mitochondrial peptide methionine sulfoxide reductase) ELISA Kit人补体片断3a(C3a)免疫试剂盒
香菇死亡相关转录因子1抗体Human COL4A3BP(Collagen type IV alpha-3-binding protein) ELISA Kit人补体片段4d(C4d)免疫试剂盒
红栓菌脱氧核糖核1抗体Human TYRO3 (Tyrosine-protein kinase receptor TYRO3) ELISA KIT人补体片段3d(C3d)免疫试剂盒
假黄色杆菌属脱氧核糖核2抗体Human VMAC (Vimentin-type intermediate filament-associated coiled-coil protein) ELISA KIT人补体片段3c(C3c)免疫试剂盒
杂色曲霉死亡防卫蛋白1抗体Human TYRP1 (5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase) ELISA KIT人补体片段3b受体(C3bR)免疫试剂盒
卢森坦类诺卡氏菌Duffy血型趋化因子受体抗体Human FAM20B(Glycosaminoglycan xylosylkinase) ELISA Kit人补体蛋白9(C9)免疫试剂盒
解淀粉芽孢杆菌DEK癌基因结合蛋白Human BTN2A1(Butyrophilin subfamily 2 member A1) ELISA Kit人补体蛋白5(C5)免疫试剂盒
酿酒酵母PSD95结合蛋白1抗体Human HMGB2(High mobility group protein B2) ELISA Kit人补体蛋白4(C4)免疫试剂盒
热带假丝酵母PSD95结合蛋白2抗体Human HMGA1(High mobility group protein HMG-I/HMG-Y) ELISA Kit人补体蛋白3(C3)免疫试剂盒
ChryseobacteriumPSD95结合蛋白4抗体Human MGP(Matrix Gla protein) ELISA Kit人补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)免疫试剂盒
: HBUM81033资源名称: 链霉菌 质量规格:分析标准品,98.8%桔皮
: IFO12550ATCC12980BGSC9A20CCM2062BCRC(formerlyCCRC)11092CCUG26241CIP66.23DSM22IAM11062JCM2501KCTC1665KCTC1752LMG6939NCCB75019NCIMB8923(formerlyNCDO1768)NCTC10339NRRLB-1172VKMB-510资源名称: 嗜热脂肪地芽孢杆菌 质量规格:分析标准品塔拉萨敏
金针菇Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer 质量规格:大豆皂苷Bb
PDE4抑制剂(AN3199)D-半乳糖(标准品)英文名称: TeniposideB和T衰减蛋白抗体包装5g
D-(标准品)英文名称: TeniposideCD4抗体包装150
D-甘露糖(标准品)英文名称: Tenofovir disoproxil fumarateCD44抗体包装2050
D-核糖(标准品)英文名称: Tenofovir/Tenofovir disoproxil fumarate白共同抗原抗体包装580
D-环丝(标准品)英文名称: TenoxicamCD5抗体包装5g
D-焦谷(标准品)英文名称: Terbinafine 间粘附分子-1抗体包装25g
D-木糖(标准品)英文名称: Terbinafine 神经粘附分子1抗体包装5g
D-丝(标准品)英文名称: Terbinafine HClL选择抗体包装25g
Deoxycorticosterone acetate...英文名称: Terbinafine HClCD68抗体包装5g
Dexamethasone Acetate(标准品)英文名称: Teriparatide acetate/Human PTH(1-34)6号染色体开放阅读框226抗体包装100g
Dexamethasone Sodium Phosph...英文名称: Terlipressin Acetate间隙连接蛋白30抗体包装25g
Dexamethasone(标准品)英文名称: Thiamphenicol2号染色体开放阅读框69抗体包装25g
Diethylstilbestrol(标准品)英文名称: Thiamphenicol3号染色体开放阅读框18抗体包装5g
DL-精(标准品)英文名称: Thymopentin Acetate巨噬炎症因子1β /MIP-1β抗体包装1g
Donepezil HCl type III(标准品)英文名称: Tiagabine HCl外基质金属蛋白诱导因子抗体包装5g