详细介绍
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
产品属性:
中文名称:细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)
英文名称:
产品规格:100次/500次/3000次/10000次
发货周期:1~3天
商品介绍:
产品原理: Cell Counting Kit(细胞增殖与毒性检测试剂盒)是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒,其性能优于目前市面上进口的CCK-8试剂盒。 WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下,可以被还原生成橙黄色水溶性的甲臜(Formazan)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。 产品优势: 可用于细胞因子诱导的细胞增殖检测、抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测、一些药物诱导的细胞生长抑制检测;操作方法非常便捷、快速。 保存条件:4°保存一年,-20°两年。 |
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
泛钙,维生B5英文名称: Indapamide4号染色体开放阅读框51抗体包装1g
泛钠(标准品)英文名称: Indapamide分支GBE1抗体包装25g
泛昔洛韦(标准品)英文名称: Iopamidol磷化丝切蛋白抗体包装5g
泛影(标准品)英文名称: Iopamidol补体成分5受体1抗体包装1g
非布索坦(标准品)英文名称: Loperamide HCl分裂周期2样蛋白激6抗体包装250mg
非洛地平(标准品)英文名称: Loperamide HCl补体C3IP1抗体包装5g
非洛地平杂质Ⅰ(标准品)英文名称: Ketorolac Tromethamine 磷化周期检测点激2抗体包装500mg
非那西丁(标准品)英文名称: Ketorolac Tromethamine 周期依赖性激11抗体包装1g
非诺贝特杂质Ⅰ(标准品)英文名称: Lansoprazole 周期依赖性激10包装5g
非诺贝特杂质Ⅱ(标准品)英文名称: Lansoprazole 8号染色体开放阅读框86抗体包装100g
非诺洛芬钙(标准品)英文名称: L base磷化分裂周期蛋白25B抗体包装10g
非普拉宗(标准品)英文名称: Levonorgestrel磷化分裂周期蛋白25B抗体包装25g
芬达唑;硫咪唑(标准品)英文名称: Levonorgestrel磷化半胱蛋白蛋白6抗体包装25MG
芬布芬(标准品)英文名称: Levosulpiride9号染色体开放阅读框172抗体包装100g
酚磺乙(标准品)英文名称: Levosulpiride磷化P27抗体/周期依赖激抑制剂包装25g
: AS3.16资源名称: 曲霉 质量规格:>98.0%,JP2002胸苷合成试剂盒五味子酚;Schisanhenol
糖霉菌Glycomyces│sp. 质量规格:HPLC>98%,标准品性激结合球蛋白试剂盒卫矛;Dulcitol
聚生壳菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 质量规格:>98.5%性别决定区Y蛋白试剂盒1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄
细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)大肠埃希 3-氯磺酰基-4-氟沙眼衣原体IgMElisa
玉米黑粉 4-氯苯磺酰脲肝Elisa
香菇Cr04 β-内啡肽,鼠前脑源性神经营养因子Elisa
大肠埃希氏杆 2,5-二氟苯疱疹病-8型感染IgG抗体Elisa
尖孢镰孢 甲基烯酸十二氟庚酯疱疹病-8型感染IgM抗体Elisa
彩色豆马勃 2-(甲硫基)乙酰单纯疱疹病1IgG抗体Elisa
荧光假单胞 Cys-Gly, oxidized单纯疱疹病1IgM抗体Elisa
尖孢镰刀 1-(4-氟苯基)哌EB病IgG抗体Elisa
扁柄侧耳 2-氯-4-氟巨病IgM抗体Elisa
红曲红曲 2-氯-5-氟单纯疱疹病2IgG抗体Elisa
褐囊蜜环 4-氨基-3-氟吡啶人类嗜T病抗体Elisa
酿酒酵母 Nefiracetam型肝炎病抗体Elisa
枯草芽孢杆 4-羟基吡啶-2-羧酸核糖核酸HElisa
黑曲霉 2-羟基甲酯EB病抗体Elisa
酿酒酵母 2-苯氧基血吸虫抗体Elisa