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详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
20T|50T|100T | 1～3天 |
商品介绍：
细胞周期(cell cycle)是指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程，通常由G0/G1 期、S 期、G2 期和M 期组成。G1 期：细胞开始RNA和蛋白质的合成，但DNA含量仍保持二倍体。S 期：DNA 开始合成，这时细胞核内DNA的含量介于G1 期和G2 期之间。当DNA 复制结束成为4倍体时，细胞进入G2 期。G2 期的细胞继续合成RNA及蛋白质，直到进入M 期。因此，单纯从DNA含量无法区分G2 期和M 期。一旦有丝分裂发生，细胞分裂成两个细胞，这两个细胞或者进入下一个细胞周期，或者进入静止期(G0期)，而G0 期从DNA含量上同样无法与G1 期区分。因此，整个复制周期可以描述为G0/G1、S、G2/M 期。通过核酸染料PI标记DNA,并由流式细胞仪进行分析，可以得到细胞各个时期的分布状态，计算出G0/G1%、S%、G2/M%，了解增殖能力，在肿瘤病理学研究中，通常以S 期细胞比率作为判断肿瘤增殖状态的指标。 PI 为插入性核酸荧光染料，能选择性的嵌入核酸DNA和RNA 双链螺旋的碱基之间与之结合，其结合的量与DNA的含量成正比例关系，用流式细胞仪进行分析，就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态，从而计算出各个期的百分含量。PI染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M 期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA 复制的S 期细胞的荧光强度为1-2 之间。 细胞周期检测试剂盒是利用细胞内DNA 能够和荧光染料结合的特性，细胞各个时期其DNA含量不同从而结合的荧光染料不同，流式细胞仪检测的荧光强度也不一样来检测细胞周期。 储存条件：-20℃避光保存。 有效期：一年。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
布林佐(标准品)英文名称： Axitinib胱抗体包装5g
布洛芬（标准品）英文名称： Azaperone胰凝乳蛋白B抗体包装1g
布美他尼;丁氧（标准品）英文名称： Azasetron HCl补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白2抗体包装5g
草（标准品）英文名称： Azelastine base 分化促进因子77抗体包装25g
草依地普仑/草（标准品）英文名称： Bacitracin Zinc 半胱蛋白抑制剂样蛋白1抗体包装5g
茶海明（标准品）英文名称： Benazepril HydrochlorideCTBS蛋白抗体包装25g
蟾它灵(标准品)英文名称： Benazepril Hydrochloride硫软骨β1/β-1,4-GalNAc-T抗体包装5g
蟾酥；华蟾酥基；华蟾精（标准品）英文名称： Bezafibrate硫软骨聚合3抗体包装25g
长春（标准品）英文名称： Bezafibrate胎盘催乳1/2抗体包装5g
长春（标准品）英文名称： Blonanserin酪激C-SRC抗体包装25g
长春质碱(标准品)英文名称： Brivudine磷化酪激C-SRC抗体包装5g
朝藿定B（标准品）英文名称： Brivudine酪蛋白激1/casein kinase Iα抗体包装1g
赤藓红（标准品）英文名称： Cabazitaxel半胱延伸蛋白α抗体包装1g
醋己锌（标准品）英文名称： Mitoxantrone磺基转移CSPS抗体包装100g
醋谷/乙酰谷酰（标准品）英文名称： Lamotrigine富含半胱蛋白2抗体包装25g
猴头菇99Hericium erinaceus 质量规格：>99.0%,BR,可用于培养血管紧张1-7试剂盒胸腺五肽;Thymopentin
传染性支气管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 质量规格：HPLC>98%,标准品血管活性肠肽试剂盒细辛脂;(-)-asarinin
东京根霉Rhizopus│tonkinensis 质量规格：>95%,BR血管动蛋白试剂盒仙鹤草酚B;agrimol B
细胞周期检测试剂盒类干酪乳杆 Alvelestat肿瘤坏死因子α转化Elisa
新泻氨基杆 Enalaprilat Dihydrate蛋白激CεElisa
蜡状芽孢杆 Bitopertin谷转氨Elisa
NCI-H1563（人胚肺） AT7519琥珀酸；丁二酸Elisa
公牛链霉 Canagliflozin病性出血病病抗体Elisa
酿酒酵母 R406 (free base)连环蛋白βElisa
岛生异担子 Ostarine盖他病抗体Elisa
抑制暗棕色杆 Nafamostat Mesylate可溶性补体激活产物SC5b9Elisa
Sphingomonas Moexipril HCl赖氢酸吡啶啉Elisa
根瘤 2-甲氧基-6-羧酸甲酯吡水痘带状疱疹病IgG抗体Elisa
灰平链霉 2,4,5,6-四氟间苯二甲核仁磷酸蛋白Elisa
贝莱斯芽胞杆 Ozagrel锌原卟啉Elisa
肠膜明串珠 4-溴-2,6-二酚金属硫蛋白Elisa
Microbacterium flavum 2-甲基肉桂酸相关蛋白A-IgG抗体Elisa
食砜节杆 异啉盐酸盐H7N9Elisa
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