人食管平滑肌原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

人食管平滑肌细胞分离自食管组织；食管可分为颈段、胸段和腹段，脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，肌层上1/3段为骨骼肌，下1/3为平滑肌，中段为骨骼肌和平滑肌混合组成。其中，肌纤维的排列方式分为内环形和外纵形两层。食管的蠕动是由食管平滑肌收缩严格控制，食管还有括约肌，位于环状软骨水平的，称为食管上括约?。晃挥谑彻芟露?，一部分在膈上，穿过膈孔，另一部分在膈下的高压带，称为食管下括约肌。食管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

公司实验室分离的人食管平滑肌细胞采用蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人食管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　?、?悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

PC-3 人前列腺癌细胞  牦牛皮肤细胞;BMU-S1  EPD5 Others Human 人 EPD5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   SERPINB3C Others Mouse 小鼠 Serpinb3c 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 兔原代淋巴管成纤维细胞 小鼠原代肠肌成纤维细胞

甘丙肽(GAL)重组蛋白 Recombinant Galanin (GAL)

IFNL3 Protein Human 重组人 IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 蛋白

PTPN6重组小鼠 PTPN6 蛋白 (aa 207-597, His & GST 标签) Protein

FCGR3 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD16 / FCGR3 蛋白 (His & AVI 标签)

SPHK1重组人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

大鼠巨噬细胞来源趋化因子(MDC)试剂盒 ，英文名： MDC ELISA Kit

Mouse lipoprotein alpha (Lp- alpha) ELISA Kit 小鼠脂蛋白α(Lp-α)试剂盒

Ratierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit 大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFN(MouseFibronectin)ELISAKit小鼠纤连蛋白

细胞肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性比色法定量试剂盒25次

RatphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit大鼠0脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)试剂盒规格：96T/48T

小鼠释放激素   英文名称：   Mouse Gonadoopin-Releasing Hormone   规格：      英文缩写：   GH

小鼠葡萄糖氧化酶   英文名称：   Mouse Glucose Oxidase   规格：      英文缩写：   GOD

小鼠胰高血糖素   英文名称：   Mouse Glucagon   规格：      英文缩写：   GC

小鼠葡萄糖60酸脱氢酶   英文名称：   Mouse Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase   规格：      英文缩写：   G6PD

人食管平滑肌原代细胞小鼠半胱酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)试剂盒

Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人细胞外信号调节激酶(ERK)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG试剂盒人菌抗体IgG(BrucellaAbIgG)试剂盒规格：96T/48T

植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒10/20次

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)试剂盒规格：96T/48T

CREG1重组小鼠 CREG / CREG1 蛋白 Protein

睾素2(TIC2)重组蛋白 Recombinant Testican 2 (TIC2)

MAPK12重组人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白 Protein

CNTF Protein Human 重组人 CNTF 蛋白

CD200R1 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD200R / OX2-R 蛋白