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详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Cell Apoptosis Ethidium Bromide Detection Kit | 100T | 1～3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍：
溴化乙啶（Ethidium Bromide EB）是一种DNA 结合性荧光色素，其激发波长510nm。发射波长595nm。产生桔红色荧光。 EB 不具有膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞，因此用EB 单染时，正常细胞不着色，早期凋亡细胞呈微弱桔红光，晚期凋亡细胞桔红色荧光增强。死细胞呈强桔红光。EB 常与橙合用双染进行凋亡检测，与橙双染时，正常细胞中EB 不能透膜着色，而橙可透过细胞膜，使细胞呈绿色均匀荧光，细胞圆形均匀；而在凋亡细胞中，细胞皱缩、染色质凝聚、固缩或断裂，出芽，凋亡小体形成。染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色颗粒；而坏死细胞被EB 染成桔红色，由此荧光颜色和细胞形态可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。 储存：2-8℃，避光，有效期12个月。 |
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
当归尾（标准品）英文名称： Chromium(III) potassium sulfate, dodecahydrateFAM102B蛋白抗体包装5g
当归?；昝仔?/span>H(标准品)英文名称： Chromium(III) sulfate, hydrateFAM104B蛋白抗体包装100g
当归?；昝仔?/span>O英文名称： Chromotrope FB肾癌下调蛋白1抗体包装25g
当药苷(标准品)英文名称： Chrysophenine凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相关抗原抗体包装5g
当药黄英文名称： Cinnamamide胎盘叶受体蛋白2抗体包装1g
党参（标准品）英文名称： Cinnamon oilFAM13B1蛋白抗体包装5g
党参炔苷（标准品）英文名称： Citral岩藻糖转移8抗体包装5g
德尔塔林(标准品)英文名称： Citrazinic acid卵泡激结合蛋白1抗体包装100g
灯台叶（标准品）英文名称： Cobalt (II) oxalate相互作用蛋白FHL2抗体包装25g
灯心草（标准品）英文名称： Concanamycin A脂肪去饱和1抗体包装5g
灯心草酚英文名称： Copper(I) bromide回肠脂肪结合蛋白抗体包装100g
灯盏细辛(灯盏花)（标准品）英文名称： Copper(II) acetate脂肪型脂肪结合蛋白包装25g
地奥司明(标准品)英文名称： Copper(II) bromide脂肪?；乖?抗体包装250mg
地胆草（标准品）英文名称： Copper(II) citrate, hydrate脆性X相关蛋白样2抗体包装50mg
地肤子（标准品）英文名称： Copper(II) hydroxide脂肪酰解2抗体包装100g
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格：>99%,BR神经生长因子受体试剂盒羟基茜草;Purpurin
死谷芽孢杆菌Bacillus│vallismortis 质量规格：>99%,BR神经生长因子前体试剂盒桤木;Alnusone
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格：>98.5%神经生长因子试剂盒乔松;Pinocembrin
溴化乙锭EB染色试剂盒大肠埃希氏杆 Sulforhodamine 101木糖基转移Elisa
解淀粉芽孢杆 Gabapentin HCl岩藻糖糖基转移Elisa
根癌土壤杆 Bradykinin triacetate salt生长因子受体结合蛋白2Elisa
拟枝孢镰孢 α－内啡肽蛋白激活亚基1Elisa
葡萄汁有孢汉逊酵母 NeurotensinEB病核抗原1Elisa
复轮生小克银汉霉 Trichostatin AEB病核抗原2Elisa
广岛链霉 Ala-Ala-AlaEB病衣壳抗原Elisa
酿酒酵母 α-Melanocyte stimulating hormone转谷氨酰2Elisa
尖孢镰孢 BRL-54443TM4SF19Elisa
平菇 Laropipran-IGFBP-4Elisa
密歇根棍状杆标记亚种 Gabexate MesylateCT-IGFBP-4Elisa
戊糖片球 WZ811TNFSF10Elisa
Priceomyces sp. 1-Pyrenebutyric hydrazideTRIM55蛋白Elisa
阿姆斯特丹曲霉 Nutlin-3红胰岛受体酪氨酸蛋白激Elisa
枯草芽孢杆枯草亚种 URB597二羟基激2Elisa
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