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详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Hoechst33258 Staining Solution(1mg/ml) | 1ml|5×1ml | 1～3天 |
商品介绍：
用途： 细胞凋亡检测、普通细胞核染色、常规的DNA染色。 注意事项： Hoechst33258染色中leagene公司推荐采用该试剂。Hoechst33258是一种荧光染料，可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。染色染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测?？芍苯佑糜诠潭ㄏ赴蜃橹南赴巳旧?，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。 储存条件：-20℃，避光，12个月 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
没药（胶质没药）（标准品）英文名称： Indole高尔基体外周膜蛋白1抗体包装50mg
没药（天然没药）（标准品）英文名称： Ethyl octanoate高尔基体膜蛋白抗体包装100mg
玫瑰花（标准品）英文名称： 2-Ethyl-1-hexanol高尔基体磷蛋白6抗体包装100mg
玫瑰花总黄英文名称： Ethyl palmitate高尔基SNAP受体复合物1抗体包装25g
蒙花苷(标准品)英文名称： 2-Ethylhexanoic acid谷草酰乙转1样蛋白1抗体包装5g
迷迭香（标准品）英文名称： p-AnisaldehydeG蛋白偶联受体52抗体包装1g
密蒙花（标准品）英文名称： Bis(2-ethylhexyl)adipate核膜糖蛋白210抗体包装5g
蜜环菌粉（标准品）英文名称： Disperse Blue 35GADD153抗体包装1g
绵萆薢（标准品）英文名称： 9-MethylanthraceneG蛋白偶联受体57抗体包装10MG
绵大戟（标准品）英文名称： MCPAGSK-3结合蛋白FRAT2抗体包装1g
绵马贯众（标准品）英文名称： Methyl oleate磷化内收蛋白gamma抗体包装250mg
绵马贯众ABBA（标准品）英文名称： Isoeugenol生长因子受体结合适应蛋白抗体包装100g
绵马ABA（标准品）英文名称： NonaneGARNL3蛋白抗体包装25g
棉花根（标准品）英文名称： 1-NaphtholTuberin样蛋白1抗体包装5g
棉子糖（标准品）英文名称： N-NitrosodiethylamineX连锁Charcot-Marie-Tooth变相关蛋白抗体包装1g
炭疽芽孢杆菌Bacillus│anthracis 质量规格：>99%,BR苹果脱氢1试剂盒络塞琳;Rosarin
北方梭囊孔菌Climacocystis│borealis 质量规格：HPLC>98%,标准品平滑肌肌动蛋白试剂盒毛两面针;toddalolactone
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 质量规格：>98%,BR嘌呤核苷磷化试剂盒磷川芎;Tetramethylpyr
Hoechst33258染色液(1mg/ml)炭黑曲霉 乙酸氯甲酯状瘤病抗体18型Elisa
海洋杆 N-羟甲基乙酰蓖麻Elisa
大肠埃希氏 1-BOC-3-甲酰肼硬皮病Elisa
瑟氏泰勒虫(成县株） 4-溴-2-氟苯乙酮硬皮病Elisa
秦氏蜜环 6-甲基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮抗多发性肌炎硬皮病抗体Elisa
布氏艾美耳球虫 2,4-二羟基-3-甲载脂蛋白DElisa
黄伞 2-乙Osterix蛋白Elisa
尖孢镰刀 羟乙酸异酯核转录因子Elisa
黑曲霉 甲基2,5-二氯异烟酸酯神经胶质成熟因子βElisa
蜡样芽孢杆 酸乙酯色氨酸羟化2Elisa
冬虫夏草 L-谷氨酸-5-叔丁酯-1-甲酯盐酸盐弹性蛋白1Elisa
灰色困难链霉 1-己基吡啶三氟甲磺酸盐乙脱氢Elisa
弗雷德里克斯堡假单胞 2,6-二甲氧基吡啶牙本质涎磷蛋白Elisa
黑化链霉 环酰鳞状癌相关抗原Elisa
酿酒酵母 2-正辛基-1-十二磷酸甘油酸脱氢Elisa
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