详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
500T|1000T | 1~3天 |
商品介绍:
绿色荧光细胞活性检测试剂盒是采用一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,检测细胞增殖情况。当荧光染色试剂其进入到细胞质后,酯酶会将其水解并留在细胞内,发出强绿色荧光,它的细胞毒性很低,不会抑制任何的细胞功能如增殖或淋巴球的趋化性。 储存条件:-20℃避光保存。 有效期:一年。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
N-乙?;咸烟牵ū曜计罚┯⑽拿疲?NilotinibC-藻蓝/藻蓝蛋白/藻青蛋白抗体包装25g
Nateglinide(标准品)英文名称: Spiramycin色P450 1A1抗体包装5g
Nifedipine(标准品)英文名称: Spiramycin丝/苏蛋白质激II α抗体包装1mg
Norepinephrine Bitartrate(标...英文名称: Spironolactone2号染色体开放阅读框66抗体包装5mg
Norethindrone(标准品)英文名称: SpironolactoneCULLIN抗体包装25mg
O,P-滴滴滴(标准品)英文名称: Carbamazepine小牛胸腺DNA抗体包装5mg
P-基异酯(标准品)英文名称: Carbamazepine1号染色体开放阅读框226抗体包装25g
Phenformin hydrochloride(标准...英文名称: Carboplatin组织蛋白L抗体包装5g
Phenne hydrochloride...英文名称: Carboplatin丝/苏蛋白激II β抗体(casein kinase IIβ)包装100g
Pioglitazone HCl(标准品)英文名称: Vincristine Sulfate角蛋白18抗体包装25g
Prednisolone acetate(标准品)英文名称: Vincristine Sulfate转化生长因子β1结合蛋白抗体包装10g
Prednisolone(标准品)英文名称: Pazopanib22号染色体开放阅读框45抗体包装50g
Prednisone Acetate(标准品)英文名称: Felodipine22号染色体开放阅读框32抗体包装100g
Prednisone(标准品)英文名称: FelodipineCD5L抗体包装25g
Pregnenolone Acetate(标准品)英文名称: 6-TG/ThioguanineCD6抗体包装500g
灵芝菌Ganoderma│lucidum (Curtis) P. Karst. 质量规格:HPLC>98%,标准品血红蛋白H试剂盒雪胆 ;Curcurbitacin
: ATCC51331资源名称: 嗜麦芽寡养单胞菌 质量规格:>98%血红蛋白C试剂盒缬草三酯;Valtrate
乳乳球菌Lactococcus│lactis 质量规格:>98.5%,USP/BP血红蛋白试剂盒香荆芥酚;5-Isopropyl-2-m
Calcein AM细胞增殖与毒性检测试剂盒根瘤 2-氨基-5-氟苯并噻唑抗父体性抗体Elisa
土壤杆属 2H-吡啶并[3,2-b]-1,4-杂氧-3(4H)-酮汉坦病IgM抗体Elisa
加拿大帚霉 2,5-二溴肺衣原体IGMElisa
球毛壳 2H-吡啶并[3,2-b]-1,4-杂氧-3(4H)-酮黑色Elisa
茶树菇 1,3-二氢-5,6-二甲基-2H-苯并咪唑-2-酮脱氧核糖核酸ⅠElisa
溃疡棒状杆 2,5-二溴SCAMP3Elisa
罗磷伞 N-基苄解偶联蛋白 1Elisa
赭绿青霉 1-(3-氯基)-4-甲基哌her2-ecdElisa
疖葡萄座腔 5-并[C][1,2,5]恶二唑分泌型卷曲相关蛋白3Elisa
马拉交替红色杆 5-并[C][1,2,5]恶二唑鸟氨酸Elisa
黄绿木霉 4-氯-2-氟肉桂酸肽基精氨酸脱亚2Elisa
德氏乳杆保加利亚亚种 环己碳酸盐肽基精氨酸脱亚4Elisa
喜温爱达荷犁头霉 4-氨基吡唑并[3,4-d]嘧啶结核杆抗体Elisa
异常威克汉姆酵母 3-甲基噻吩-2-羧酸神经丝蛋白LElisa
热葡糖苷地芽孢杆 对己基溴苯白介4受体Elisa