详细介绍
商品介绍:
PF-04447943是一种有效的人重组PDE9A抑制剂,IC50为12nM,比作用于其他PDE家族成员选择性高78倍(IC50>1000nM)。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:1082744-20-4 纯度:99.77% 分子式:C??H??N?O? 分子量:395.46 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
PF-04447943 | 1mL(10mM)|5mg|10mg | 1~3天 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
绿色糖单孢菌外基质磷化抗体Human HPSE(Heparanase) ELISA Kit尿游离皮质(UFC)ELISA Kit
枯草芽孢杆菌肥大蛋白7抗体Human MRAS ELISA Kit尿微量白蛋白(MAU/ALB)ELISA Kit
白僵菌微管相关蛋白4抗体Human MRE11 ELISA Kit尿微量白蛋白(MAU)ELISA Kit
普通变形杆菌26S蛋白调节亚型7抗体Human MRI1 ELISA Kit尿微量白蛋白(ALB)ELISA Kit
苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种蛋白酪磷非受体型4抗体Human MRFAP1 ELISA Kit尿相关蛋白C(UreC)ELISA Kit
坟墓节杆菌脑肠肽O?;瓶固錒uman MRM1 ELISA Kit尿嘧啶核苷磷化1(UPP1)ELISA Kit
水生黄杆菌转录调控因子MRG15抗体Human G6PD(Glucose-6-phosphate 1-dehydrogenase) ELISA Kit尿激型纤溶原激活因子(uPA)ELISA Kit
费氏中华根瘤菌髓系/淋巴混合谱系白血病蛋白5抗体Human OPRM1(Mu-type opioid receptor) ELISA Kit尿激型纤溶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA Kit
长双歧杆菌T淋巴成熟相关蛋白抗体Human MPP3 ELISA Kit尿激型纤溶原激活物(uPA/PLAU)ELISA Kit
串珠镰孢甲基二尿症cblA抗体Human TLR9(Toll-like receptor 9) ELISA Kit尿激型纤溶原激活物(uPA)ELISA Kit
黄海鞘盒菌非平滑肌肌球蛋白2A抗体Human MPPE1 ELISA Kit尿激型纤溶原激活剂受体(uPAR)ELISA Kit
枯草芽胞杆菌枯草亚种DNA修复甲基磺敏感性基因19抗体Human MOGAT2 ELISA Kit尿激(UK)ELISA Kit
针叶树散斑壳19号染色体开放阅读框28抗体Human MOGAT1 ELISA Kit尿肌酐(UCR)ELISA Kit
酱油曲霉珠蛋白1抗体Human MOK ELISA Kit尿苷二磷葡萄糖神经酰葡萄糖基转移(UGCG)ELISA Kit
露湿漆斑菌肌红蛋白抗体Human MPPED1 ELISA Kit尿苷二磷葡萄糖转移2(UGT2)ELISA Kit
节杆菌错配修复蛋白6抗体Human MPPED2 ELISA Kit尿苷二磷葡萄糖转移1(UGT1)ELISA Kit
黑根霉Rhizopus│niger 质量规格:>98%,BR白果内酯
长枝木霉Trichoderma│longibrachiatum Rifai 质量规格:>98%,BR银杏内酯C
根瘤菌Rhizobium│sp. 质量规格:>99%,BR银杏内酯B
人重组PDE9A抑制剂(PF-04447943)EGF 表皮生长因子抗体(大鼠)酯 ≥99%(GC)
EGFL7 类表皮生长因子域7抗体酯 for HPLC, ≥99.5% (GC)
EGFR 表皮生长因子受体抗体酯 无水级, 99.5%
EF1 Alpha 延伸因子EF-1a抗体肉桂酯 99%
EGFRvIII 表皮生长因子受体III型突变体抗体肉桂酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG
Egr-1 早期生长应答蛋白1抗体酯 99%
eIF2 alpha 真核启动因子2α抗体酯 ≥99%, FCC
Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 化真核启动因子2α抗体癸酯 Standard for GC ,≥99.5% (GC)