详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
1000T|5000T | 1~3天 |
商品介绍:
细胞膜染色试剂盒是用一种亲脂性的绿色荧光探针进行细胞膜染色。染色液O 进入细胞膜后,在整个细胞膜上扩散,佳浓度时可以使整个细胞膜染色。染色液O在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命??梢杂帽曜嫉腇ITC滤光片检测。 染色液O 通常不会明显影响细胞的活力,因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。 储存条件:4℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。 有效期:六个月。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
雷公藤内酯(标准品)英文名称: Tantalum standard磷化gamma基丁B型受体1抗体包装100mg
雷公藤内酯(标准品)英文名称: lurium standard磷化谷受体2抗体包装25g
雷公藤宁碱A英文名称: Terbium standard磷化鸟苷调节蛋白12抗体包装5g
雷公藤乙(标准品)英文名称: Vanadium solution珠蛋白转录因子1抗体包装10g
类叶升麻苷,毛蕊花糖苷(标准品)英文名称: Yttrium standard过氧化3包装1g
藜芦英文名称: Zinc standard过氧化4抗体包装1g
里卡灵A英文名称: Zinc standard高尔基体膜蛋白GP73抗体包装5g
利卡灵-B;利卡灵B英文名称: Vamidothion standard solutionG蛋白偶联受体172B抗体包装1g
利血平(标准品)英文名称: Vacuum pump oil生发中心B淋巴相关蛋白2抗体包装1g
栎樱(标准品)英文名称: Vacuum pump oilG蛋白转录因子α3抗体包装5g
连钱草(标准品)英文名称: Vacuum pump oilG蛋白偶联受体124抗体(肿瘤血管内皮标记物)包装10ml
连翘(标准品)英文名称: Vacuum pump oil半乳糖凝集1抗体包装50ml
连翘苷(标准品)英文名称: Violuric acid monohydrateα葡萄糖苷2抗体包装25g
连翘酯苷A(标准品)英文名称: Vitamin E acetate半乳糖凝集7抗体包装25g
连翘酯苷B(标准品)英文名称: Uniconazole特异性囊肿病液体蛋白15抗体包装5g
: LMG20263=DSM40172=ATCC19805=ATCC19921=CBS5资源名称: 玫瑰暗黄链霉菌 质量规格:HPLC>98%,标准品羟基戊二单酰还原试剂盒牡荆内酯;Vitexilactone
44409T资源名称: Amycolatopsis keratiniphila subsp. keratiniphila 质量规格:>99%羟基戊二单酰试剂盒毛地黄;Digitaline
传染性喉气管炎病毒Alphaherpesvirinae│Infectious laryngotracheitis virus 质量规格:HPLC>98%,标准品羟基赖正己试剂盒麦芽糖;Maltose
细胞膜染色试剂盒(绿色荧光)-M01闪光须霉 醋酸磺米隆CC趋化因子配体23Elisa
金灰青霉 5-溴-4-氯-3-辛酯辣椒Elisa
红曲红曲 1-羟基蒽醌速激肽Elisa
分枝卷霉 (S)-(+)-联萘酚二对甲苯磺酸酯唇腭裂跨膜蛋白1样蛋白Elisa
溶藻弧 3-(甲氨基)6磷酸果糖激1Elisa
豇豆慢生根瘤 1,3,5-三(N,N-二苯基氨基)苯防御α1Elisa
猪链球 4-甲基-3-氧代-N-苯基-2-(苯甲烯基)戊酰骨成型蛋白Elisa
成团泛 (1,5-环辛二烯)二铂(II)可溶性甘露糖结合凝集2Elisa
孟氏假单胞 Prussian blue soluble膜受体蛋白Elisa
屎肠球 2-溴-4,5,6-三氟苯网状蛋白4Elisa
硬结节杆 三(4 -甲氧基- 3 ,5 -二甲苯基)膦网状蛋白4BElisa
Massilia dura (R,R)-N,N'-双(三氟磺酰)-1,2-二苯基乙二含主要协助转运蛋白超家族域蛋白2AElisa
宇佐美曲霉 阿仑膦酸钠NDUFB4Elisa
中慢生华癸根瘤 2,3-二氟苯乙NDUFB8Elisa
岛生坂野酵母 硒化铟(III)磷酸化过氧化物体增殖因子活化受体γElisa