詳細(xì)介紹
本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗,不做其他科學(xué)實驗外的使用!
產(chǎn)品名稱:大鼠冠狀動脈平滑肌原代細(xì)胞
英文名稱:Rat Coronary Artery Smooth Muscle Cells
規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:GOY-01X0965
分類:大鼠原代細(xì)胞
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
傳代特性 | 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳 |
消化液 | 0.25% |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,分左右兩支,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支。左冠狀動脈為一短干,發(fā)自左主動脈竇,經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動脈壁的主要細(xì)胞成分,細(xì)胞膜上分布著多種離子通道,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細(xì)胞膜電位的復(fù)極化、超極化,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細(xì)胞增殖、炎癥及凋亡等。因此,原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細(xì)胞,對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機(jī)制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
準(zhǔn)備DMEM高糖,10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清。
1)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
2)凍存液:90%培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2、細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
HepG2/2-15細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞,RAW 264.7細(xì)胞 大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3 前脂肪細(xì)胞分化PADM-prf 細(xì)胞名稱 M-37細(xì)胞 G-7(小鼠骨骼肌肌肉母瘤細(xì)胞) 人胰腺星狀細(xì)胞 MJ 小鼠原代表皮干細(xì)胞 大鼠原代膀胱上皮細(xì)胞
神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)重組蛋白 Recombinant Neuronal Pentraxin II (NPTX2)
ICOS Protein Human 重組人 ICOS / AILIM / CD278 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
HGFA重組人 HGFA 蛋白 Protein
HA Protein H15N8 重組甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
CSF3重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b) Protein
大鼠細(xì)胞絨毛蛋白(CVL)試劑盒 ,英文名: CVL ELISA Kit
Mouse kidney injury molecule 1 (Kim-1) ELISA Kit 小鼠腎損傷分子1(Kim-1)試劑盒
Mousecardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHsp-60ELISAKit大鼠熱休克蛋白60
細(xì)胞LYNB激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-1β大鼠白介素1β
小鼠C反應(yīng)蛋白 英文名稱: C-reactive protein 規(guī)格: 英文縮寫: CRP
小鼠CXC趨化因子受體3 英文名稱: CXC chemokine receptor 3 規(guī)格: 英文縮寫: CXCR3
小鼠CXC趨化因子配體16 英文名稱: CXC chemokine ligand 16 規(guī)格: 英文縮寫: CXCL16
小鼠CXCL1/KC 英文名稱: CXC chemokine ligand 1 規(guī)格: 英文縮寫: CXCL1/KC
大鼠冠狀動脈平滑肌原代細(xì)胞小鼠前列腺素F(PGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 人抗復(fù)合物(TAT)試劑盒
HumanArginase,ArgELISAKit 人精酶(Arg)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-α試劑盒豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次
MouseBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
TLR2重組大鼠 TLR2 蛋白 Protein
GAD-65 (glutamate decarboxylase 0.5mgGAD-65 (glutamate decarboxylase) 谷脫羧酶-65(C端多肽)
CD82重組人 CD82 / KAI-1 蛋白 Protein
ENPP5 Protein Human 重組人 ENPP5 蛋白
SLAMF6 Protein Mouse 重組小鼠 SLAMF6 / Ly108 蛋白
1、收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3、用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4、請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的培養(yǎng)基。
5、建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和微生物菌種查詢網(wǎng)技術(shù)部溝通交流。
6、該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。