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上海谷研實業(yè)有限公司>公司動態(tài)>轉化細胞免疫熒光實驗步驟

公司動態(tài)

轉化細胞免疫熒光實驗步驟

閱讀:239          發(fā)布時間:2017-7-31

研究人員為您解析的轉化細胞免疫熒光實驗步驟:
1. 細胞一定要貼在玻片上(可以放入24孔板),為后面照像打基礎。細胞密度適中,大約60-75%滿片即可,否則容易脫片。
2. 取出細胞后用4%多聚甲醛固定15分鐘,現(xiàn)用現(xiàn)配。(以下各步驟切毋使玻片干燥)
3. PBS沖洗
4. 0.1%Triton作用20分鐘
5. PBS沖洗 
6. 10%正常血清封閉10分鐘
7. 加入一抗,4度孵育過夜(找個小瓶蓋將小玻片支起來,抗體就不容易溢出),還要記住“砸片”,就是抗體從較高處落到片子上,以分布均勻??贵w稀釋度1:60,較常用!
8. PBS沖洗4次,各5分鐘
9加入熒光二抗,室溫30分鐘??贵w稀釋度1:400,較常用!
10.  同8。
11. 90%甘油封片。也很關鍵阿,多封幾次才有體會。
12. 避光保存轉化細胞,或到顯微鏡下觀察。
Endothelin-1  內皮素-1(多肽抗原)    現(xiàn)貨供應    規(guī)格:     0.5mg
Endothelin-1 (ET-1)  內皮素-1(抗原)    *    規(guī)格:     0.5mg
ERAB   內質網(wǎng)Aβ相關結合蛋白(抗原)    進口/國產    規(guī)格:     0.5mg
ER-Alpha peptide  雌激素受體(多肽抗原)    現(xiàn)貨供應    規(guī)格:     0.5mg
TIMP-1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1)  金屬蛋白酶組織抑制因子-1(抗原)    *    規(guī)格:     0.5mg
轉化細胞

 

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